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喹諾酮類-喹諾酮類ELISA檢測試劑盒
  • 喹諾酮類-喹諾酮類ELISA檢測試劑盒

貨物所在地:山東濱州市

地: 山東省濱州市黃河二路169號

更新時間:2025-05-21 21:00:08

瀏覽次數(shù):153

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喹諾酮類ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品中喹諾酮類的殘留量,。定量檢測組織,、生鮮奶樣本中喹諾酮類殘留,。

一,、原理

喹諾酮類ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品喹諾酮類殘留量,。

二、適用范圍

喹諾酮類ELISA檢測試劑盒定量檢測組織,、生鮮奶樣本中喹諾酮類殘留,。

三、試劑盒特點及技術指標

* 檢 測 時 間 : 30min

  試劑盒靈敏度: 0.1ppb(µg/kg)

* 試劑盒檢測純陰性樣本的背景值<4ppb,;

* 樣品處理方法簡潔,,符合率大于95%;

試劑盒檢測樣本的靈敏度和準確度:

試劑盒交叉反應率:

藥物

交叉反應率

喹諾酮類(QNS)

100

恩諾沙星(ENR)

100

環(huán)丙沙星(CIF)

86

依諾沙星(EN

 

,、所需材料

儀器微孔板酶標儀450 nm/630 nm,、均質(zhì)器,、振蕩器離心機,、天平(感量0.01 g),、離心管(5 mL, 50 mL)

微量移液器:單道 1µL~10 µL、10 µL~100µL

多道 50µL~300µL

試劑:去離子水,、乙腈,、正己烷

、 試劑盒組成

序號

組成部分

96T裝量

1

喹諾酮類酶標板

12×8孔

2

喹諾酮類標準*5

0.5-1mL

3

喹諾酮類酶標物

7 mL

4

喹諾酮類抗體

7 mL

5

底物A液

7 mL

6

底物B液

7 mL

7

終 止 液

7 mL

8

20×濃縮洗滌液

40 mL

9

2×喹諾酮類樣品稀釋液

40mL

樣本

檢測下限

回收率

組織

10ppb 

70%-120%

蜂蜜

10ppb 

70%-120%

*注:A,、B,、C、D,、E共5個標準品濃度為:0ppb, 0.1ppb, 0.3ppb, 0.9ppb, 2.7ppb,,A、B標準品各1mL,,其余各0.5mL,,直接使用。

六,、溶液配制

配液1: 洗滌工作液

用去離子水將20×濃縮洗滌液按1 : 19體積比進行稀釋,,用于酶標板的洗滌,洗滌工作液在4℃環(huán)境可保存一個月,,用前一天取出回溫,。

配液2: 1×喹諾酮類樣品稀釋液

   用去離子水將2×喹諾酮類樣品稀釋液按1: 1的體積比進行稀釋,用于樣本前處理的稀釋,,

七,、樣本前處理                                                   

樣本處理前須知:

① 處理完的樣品應及時進行下步檢測,實驗中必須使用一次性吸頭,,吸取不同試劑時要更換吸頭,。② 樣本數(shù)目超過8個時推薦使用排槍加樣。

組織(稀釋倍數(shù):100)

① 稱取樣品1.0g ± 0.05g至50mL離心管中,,加入2mL 0.01M 氫氧化鈉,,震蕩提取1min,加入2mL乙腈 震蕩提取1min,;

② 4000rpm離心5min.,;

③ 小心取出層溶液50μL至另一離心管,加入950μL 0.01M PBS,,震蕩混勻30s,,取50μL用于分析。

生鮮奶(稀釋倍數(shù):100)

10μL生鮮奶至另一離心管,,加入990μL 去離子水,,震蕩混勻30s,,取50μL用于分析。

,、 酶標免疫測定程序

  • 將所有所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,,待其*回升至室溫后方可使用,根據(jù)體積大小不同取出回溫的時間從1小時~2小時,。注意每種液體試劑使用前均須搖勻,。
  •  按標準品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。
  •  加標準品/樣品,、酶,、抗體:加標準品/樣品50µL到對應的微孔中,加入喹諾酮類酶標物50µL/孔,,加入喹諾酮類抗體50µL/孔,,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應20min,。
  •  洗板:小心揭開蓋板膜,,將孔內(nèi)液體甩干,

加入洗滌工作液300 µL/孔,,每次靜置20s,,甩去孔內(nèi)液體,重復洗滌3次,,后一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破),。

  •  顯色:加入底物液A液50 µL/孔,再加底物    

   液B液50 µL/孔,,輕輕振蕩混勻,,用蓋板膜             

     蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應10min。

  • 測定:加入終止液50µL/孔,,用酶標儀立即  測定450/630nm處的吸光度值。

,、 結(jié)果判定

以標準品百分吸光率為縱坐標,,以喹諾酮類標準品濃度(ppb)的半對數(shù)為橫坐標,繪制標準曲線圖,。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,,從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度,乘以其對應的稀釋倍數(shù)即為樣本中喹諾酮類實際濃度,。(詳見試劑盒專業(yè)分析軟件,,以便進行大量樣本的分析計算。)

,、 注意事項

① 根據(jù)體積大小不同取出回溫的時間從1小時~3小時,,體積15毫升以上的先從冷藏環(huán)境取出回溫,,

②  洗板拍干后應立即進行下一步操作

反應終止液為2M硫酸,,避免接觸皮膚,。

不使用過了有效期的試劑盒,不交換使用不同批號的試劑,。

⑤ 0標準的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,,表示試劑可能變質(zhì)。

⑥ 在加入底物液A液和底物液B液后,,一般顯色    時間為15min即可,。若顏色較淺,可延長反應時間到20min,,反之則減短反應時間,。

⑦ 底物液B液長期使用變?yōu)闇\藍色時,請放心使用,,不影響檢測結(jié)果,。

 未提及樣本請致電本公司技術服務部。

十一,、貯藏條件及保存期

    貯藏條件: 28

保 質(zhì) 期: 12個月

 

 

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