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植物RNA核酸免提取試劑盒（多糖多酚類）

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒采用專門針對(duì)多糖多酚類植物樣本開發(fā)的裂解液PP,，在10分鐘內(nèi)完成植物葉片,、根、莖,、花蕊,、種子等的裂解、提取和純化,。提取對(duì)象包括棉花,、馬鈴薯、鐵皮石斛等,。整個(gè)提取無需使用蛋白酶K等酶類制劑,。該配方中含有RNA保護(hù)劑，能夠抑制RNA降解,、保護(hù)RNA完整,，從而提高產(chǎn)量。提取RNA可用于RT-PCR,、RT-qPCR,、Northern Blot、分子克隆,、文庫構(gòu)建等,。

本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床,、食品,、化妝品等領(lǐng)域。

試劑盒組成

備注：第一次使用前,，在洗滌液PWB中加入48mL無水乙醇,，并標(biāo)記“√"和時(shí)間，避免重復(fù)加入,。

保存條件

室溫保存一年,。

自備材料

水浴鍋或金屬浴、無水乙醇,、1.5mL無RNase離心管,、β-巰基乙醇,、DNase I（2U/μL，或貨號(hào)QR0102）

使用方法

1. 20-100mg新鮮植物樣本經(jīng)過液氮研磨后,，加入700μL裂解液PP和35μLβ-巰基乙醇,，渦旋30秒。

2. 55℃孵育1分鐘,。

備注：淀粉含量高的樣本直接進(jìn)行步驟3,。

3. 12,000rpm離心1分鐘，吸取500μL上清液,。

4. 加入250μL無水乙醇,，上下顛倒混勻。

5. 全部加入RNA吸附柱中,，12,000rpm離心1分鐘,，倒掉收集管中廢液。

6. 向RNA吸附柱中加入500μL洗滌液PWA,，12,000rpm離心30秒,，倒掉收集管中廢液。

7. 向RNA吸附柱中加入500μL洗滌液PWB,，12,000rpm離心30秒,，倒掉收集管中廢液。

8. 重復(fù)步驟7一次,。

9. 12,000rpm離心2分鐘,，倒掉收集管中廢液。

10. 將RNA吸附柱放入新1.5mL無RNase離心管,，加入30-50μL 洗脫液P,，室溫放置1分鐘。 

11. 12,000rpm離心2分鐘,，得到RNA溶液,，-80℃保存。

注意事項(xiàng)

1. 務(wù)必在超凈臺(tái)中進(jìn)行操作,，常換手套,，防止RNA降解。

2. 盡可能使用新鮮樣本進(jìn)行RNA提取,。

3. 使用無DNase無RNase的吸頭和離心管,，防止RNA降解,，常更換吸頭,，防止交叉污染。

4. 為了提高洗脫效率,，可提前將洗脫液PP置于65℃水浴后再使用,。

5. 根據(jù)后續(xù)試驗(yàn)需求,，請(qǐng)使用DNase I（貨號(hào)QR0102）進(jìn)行基因組清除。

常見問題解析