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植物DNA核酸免提取試劑盒

試劑盒應用

本試劑盒采用zhuan利裂解液配方在10分鐘內(nèi)完成植物葉片,、根、莖,、花蕊,、種子等的裂解、提取和純化,。提取對象包括水稻,、玉米、小麥,、油菜等作物,。整個提取過無需使用蛋白酶K等酶類制劑。提取DNA可用于PCR,、qPCR,、Sorthern Blot、分子克隆,、文庫構(gòu)建等,。

本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床,、食品,、化妝品等領域,。

試劑盒組成

備注：第一次使用前，在洗滌液DWB中加入48mL無水乙醇,，并標記“√"和時間,，避免重復加入。

保存條件

室溫保存一年,。

自備材料

水浴鍋或金屬浴,、無水乙醇、無DNase和無RNase離心管,、RNaseA（10mg/mL,，或貨號QR0101）

使用方法

1. 20-100mg新鮮植物樣本經(jīng)過液氮研磨后，加入700μL裂解液DP,，渦旋30秒,。

2. 55℃孵育1分鐘。

備注：淀粉含量高,，例如馬鈴薯等直接進行步驟3,。

3. 12,000rpm離心1分鐘，吸取500μL上清液,。

4. （選做）加入5μL RNase A（10mg/mL）,，室溫靜置5-10分鐘。

5. 加入250μL無水乙醇,，上下顛倒混勻,。

6. 全部加入DNA吸附柱中，12,000rpm離心1分鐘,，倒掉收集管中廢液,。

7. 向DNA吸附柱中加入500μL洗滌液DWA，12,000rpm離心30秒,，倒掉收集管中廢液,。

8. 向DNA吸附柱中加入500μL洗滌液DWB，12,000rpm離心30秒,，倒掉收集管中廢液,。

9. 重復步驟8一次。

10. 12,000rpm離心2分鐘,，倒掉收集管中廢液,。

11. 將DNA吸附柱放入新無DNase和無RNase離心管中，加入30-50μL洗脫液P,，室溫放置1分鐘,。

12. 12,000rpm離心2分鐘，得到DNA溶液，-80℃保存,。

注意事項

1. 經(jīng)常更換手套,，防止DNA污染。

2. 使用無DNase無RNase的吸頭和離心管,，防止DNA降解,。

3. 常更換吸頭，防止交叉污染,。

4. 動作輕柔,，防止基因組DNA斷裂。

5. 為了提高洗脫效率,，可提前將洗脫液P置于65℃水浴后再使用,。