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供貨周期 | 一周 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
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植物DNA核酸免提取試劑盒(高產(chǎn)量)
試劑盒應(yīng)用
本試劑盒采用zhuan利裂解液配方在10分鐘內(nèi)完成植物葉片,、根,、莖、花蕊,、種子等的裂解,、提取和純化。提取對象包括水稻,、玉米,、小麥、油菜等作物,。整個提取過無需使用蛋白酶K等酶類制劑,。提取DNA可用于PCR、qPCR,、Sorthern Blot,、分子克隆、文庫構(gòu)建等,。
本試劑盒僅供研究使用,,不可用于臨床、食品,、化妝品等領(lǐng)域,。
試劑盒組成
組分 | Col-D0203(50T) | 編號 |
裂解液DPD | 35 mL | Col-D0203A |
洗滌液DWA | 25 mL | Col-D0203B |
洗滌液DWB | 12 mL | Col-D0203C |
洗脫液P | 5 mL | |
DNA吸附柱 | 50套 | Col-D0203E |
備注:第一次使用前,在洗滌液DWB中加入48mL無水乙醇,,并標(biāo)記“√"和時間,,避免重復(fù)加入。
保存條件
室溫保存一年,。
自備材料
水浴鍋或金屬浴,、無水乙醇,、無DNase和無RNase離心管、β-巰基乙醇,、RNaseA(10mg/mL,,或貨號QR0101)
使用方法
1. 20-100mg新鮮植物樣本經(jīng)過液氮研磨后,加入700μL裂解液DPD和14μLβ-巰基乙醇,,渦旋30秒,。
2. 55℃孵育1分鐘。
備注:淀粉含量高,,例如馬鈴薯等直接進行步驟3,。
3. 12,000rpm離心1分鐘,吸取500μL上清液,。
4. (選做)加入5μL RNase A(10mg/mL),室溫靜置5-10分鐘,。
5. 加入250μL無水乙醇,,上下顛倒混勻。
6. 全部加入DNA吸附柱中,,12,000rpm離心1分鐘,,倒掉收集管中廢液。
7. 向DNA吸附柱中加入500μL洗滌液DWA,,12,000rpm離心30秒,,倒掉收集管中廢液。
8. 向DNA吸附柱中加入500μL洗滌液DWB,,12,000rpm離心30秒,,倒掉收集管中廢液。
9. 重復(fù)步驟8一次,。
10. 12,000rpm離心2分鐘,,倒掉收集管中廢液。
11. 將DNA吸附柱放入新無DNase和無RNase離心管中,,加入30-50μL洗脫液P,,室溫放置1分鐘。
12. 12,000rpm離心2分鐘,,得到DNA溶液,,-80℃保存。
注意事項
1. 經(jīng)常更換手套,,防止DNA污染,。
2. 使用無DNase無RNase的吸頭和離心管,防止DNA降解,。
3. 常更換吸頭,,防止交叉污染,。
4. 動作輕柔,防止基因組DNA斷裂,。
5. 為了提高洗脫效率,,可提前將洗脫液P置于65℃水浴后再使用。
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