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植物DNA核酸免提取試劑盒（多糖多酚類）

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒采用zhuan利裂解液配方在10分鐘內(nèi)完成植物葉片,、根,、莖、花蕊,、種子等的裂解,、提取和純化。提取對(duì)象包括棉花,、馬鈴薯,、鐵皮石斛等。整個(gè)提取過無需使用蛋白酶K等酶類制劑,。提取DNA可用于PCR,、qPCR、Sorthern Blot,、分子克隆,、文庫構(gòu)建等。

本試劑盒僅供研究使用,，不可用于臨床,、食品、化妝品等領(lǐng)域,。

試劑盒組成

備注：第一次使用前,，在洗滌液DPW2中加入48mL無水乙醇,，并標(biāo)記“√"和時(shí)間，避免重復(fù)加入,。

保存條件

室溫保存一年,。

自備材料

水浴鍋或金屬浴、無水乙醇,、無DNase和無RNase離心管,、β-巰基乙醇、RNaseA（10mg/mL,，或貨號(hào)QR0101）

使用方法

1. 20-100mg新鮮植物樣本經(jīng)過液氮研磨后,，加入700μL裂解液DPP和35μL β-巰基乙醇，渦旋30秒,。

2. 55℃孵育1分鐘,。

備注：淀粉含量高的樣本直接進(jìn)行步驟3。

3. 12,000rpm離心1分鐘,，吸取500μL上清液,。

4. （選做）加入5μL RNase A（10mg/mL），室溫靜置5-10分鐘,。

5. 加入250μL無水乙醇,，上下顛倒混勻。

6. 全部加入DNA吸附柱中,，12,000rpm離心1分鐘,，倒掉收集管中廢液。

7. 向DNA吸附柱中加入500μL洗滌液DPW1,，12,000rpm離心30秒,，倒掉收集管中廢液。

8. 向DNA吸附柱中加入500μL洗滌液DPW2,，12,000rpm離心30秒,，倒掉收集管中廢液。

9. 重復(fù)步驟8一次,。

10. 12,000rpm離心2分鐘,，倒掉收集管中廢液。

11. 將DNA吸附柱放入新無DNase和無RNase離心管中,，加入30-50μL洗脫液P,，室溫放置1分鐘。

12. 12,000rpm離心2分鐘,，得到DNA溶液,，-80℃保存,。

注意事項(xiàng)

1. 經(jīng)常更換手套,，防止DNA污染,。

2. 使用無DNase無RNase的吸頭和離心管，防止DNA降解,。

3. 常更換吸頭,，防止交叉污染。

4. 動(dòng)作輕柔,，防止基因組DNA斷裂,。

5. 為了提高洗脫效率，可提前將洗脫液P置于65℃水浴后再使用,。