鼠抗鏈霉素單克隆抗體的制備是一個(gè)涉及免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等多個(gè)學(xué)科的復(fù)雜過(guò)程,。以下是其基本流程：
1,、抗原制備與純化:首先,，需要獲取高純度的鏈霉素作為抗原。確?？乖募兌群突钚允顷P(guān)鍵,，因?yàn)椴患兊幕蚴Щ畹目乖赡軐?dǎo)致產(chǎn)生的抗體與非目標(biāo)分子發(fā)生交叉反應(yīng)。
2,、動(dòng)物免疫:選擇一個(gè)合適的小鼠品種進(jìn)行免疫,。通過(guò)皮下或腹腔注射抗原，通常與佐劑混合以增強(qiáng)免疫反應(yīng),?？赡苄枰啻渭訌?qiáng)免疫以確保獲得足夠的抗體滴度。
3,、檢測(cè)血清抗體滴度:在免疫過(guò)程中,，定期從小鼠尾部取血，使用ELISA或其他方法檢測(cè)血清中的鏈霉素特異性抗體滴度,。當(dāng)達(dá)到滿(mǎn)意的滴度時(shí),，可以進(jìn)行下一步。
4,、融合實(shí)驗(yàn):將產(chǎn)生高滴度抗體的小鼠的脾臟細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞(如SP2/0)融合,，形成雜交瘤細(xì)胞。這一步驟通常使用PEG(聚乙二醇)或電融合技術(shù),。
5,、選擇和篩選:將融合后的雜交瘤細(xì)胞種植在含有HAT培養(yǎng)基的96孔板中。只有成功融合并具有生長(zhǎng)能力的雜交瘤細(xì)胞才能在這種選擇性培養(yǎng)基中存活,。
6,、陽(yáng)性克隆的篩選與擴(kuò)增:使用ELISA或其他方法對(duì)雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體進(jìn)行篩選，找到能夠特異性識(shí)別鏈霉素的克隆,。將陽(yáng)性克隆轉(zhuǎn)移到更大的培養(yǎng)容器中進(jìn)行擴(kuò)增,。
7、單克隆抗體的純化:當(dāng)雜交瘤細(xì)胞數(shù)量足夠時(shí),，可以收集培養(yǎng)液并從中純化,。常用的純化方法有蛋白A柱層析法。
8,、驗(yàn)證單克隆抗體的性質(zhì):使用多種技術(shù)來(lái)驗(yàn)證特異性,、親和力和其他性質(zhì)。
9,、擴(kuò)大生產(chǎn)與儲(chǔ)存:根據(jù)需要,，可以在體外大規(guī)模培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)更多的鼠抗鏈霉素單克隆抗體，或?qū)⑵淅鋬霰４嬉詡浜笥谩?/div>
會(huì)員.png)
9
立即詢(xún)價(jià)
您提交后,，專(zhuān)屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)