單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一,、僅針對某一特定抗原表位的抗體,。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤,。
單克隆抗體是人工制備的雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)的,雜交瘤細(xì)胞是由一個經(jīng)抗原激活后的B細(xì)胞與一個骨髓瘤細(xì)胞融合形成,。單克隆抗體優(yōu)點(diǎn):純度高,,靈敏度高,特異性強(qiáng),,交叉反應(yīng)少,,制備的成本低。缺點(diǎn):對技術(shù)有一定的要求,,而且通過抗原的化學(xué)處理很容易丟失表位,。
單克隆抗體的大量制備主要采用動物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法:
(1)體內(nèi)誘生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進(jìn)行預(yù)處理,。1-2周后,,腹腔內(nèi)接種雜交瘤細(xì)胞,。雜交瘤細(xì)胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖,并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體,。約1-2周,,可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,,即可獲得大量單克隆抗體,。
(2)體外培養(yǎng)法將雜交瘤細(xì)胞置于培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,,雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體,,收集培養(yǎng)上清液,離心去除細(xì)胞及其碎片,,即可獲得所需要的單克隆抗體,。但這種方法產(chǎn)生的抗體量有限。各種新型培養(yǎng)技術(shù)和裝置不斷出現(xiàn),,大大提高了抗體的生產(chǎn)量,。
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