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玉米赤霉烯酮免疫親和柱的樣本處理步驟分析

閱讀:867      發(fā)布時(shí)間:2023-3-5
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  玉米赤霉烯酮免疫親和柱是玉米赤霉菌的代謝產(chǎn)物,,具有類雌激素樣作用,具有較強(qiáng)的生殖毒性和致畸作用,,可引起動(dòng)物發(fā)生雌激素亢進(jìn)癥,,導(dǎo)致動(dòng)物不孕或流產(chǎn),對(duì)家禽,、豬,、牛和羊的影響較大,給畜牧業(yè)帶來(lái)很大的經(jīng)濟(jì)損失,。
 
  玉米赤霉烯酮免疫親和柱的樣本處理步驟:
 
  花生,,玉米,大米,小麥及其制品和飼料
 
  1,、稱取50g粉碎的樣品于100mL容量瓶中,,加入5.0g氯化鈉,以樣品提取液定容,;
 
  2,、轉(zhuǎn)移至均質(zhì)杯中,在均質(zhì)器上高速攪拌,,提取2分鐘,;
 
  3、4000r/min離心5min或用定量濾紙過(guò)濾
 
  4,、取10mL濾液并加入40mLPBS緩沖液稀釋,,用玻璃微纖維濾紙過(guò)濾,取過(guò)濾后液體待測(cè),;
 
  5,、將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器,;
 
  6,、將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約1滴/S的流速緩慢通過(guò)免疫親和柱,,直至2~3mL空氣通過(guò)柱體,;
 
  7、以10.0mL的PBS溶液和去離子水依次淋洗柱子1次,,流速約為1滴-2滴/S,,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過(guò)柱體,;
 
  8,、準(zhǔn)確加入1.0mL色譜級(jí)甲醇洗脫,流速為1滴/S,,收集全部洗脫液于玻璃試管中,,供檢測(cè)用。
 

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