為了制造鼠抗地塞米松單克隆抗體,,首先將免疫抗原注射到宿主動物中,。一旦免疫原引起免疫反應,就會從脾臟中提取B細胞并與骨髓瘤細胞(癌癥B細胞)融合,。健康的脾細胞不會在細胞培養(yǎng)中無限期地存活,,因此進行這種融合過程以制造永生細胞系,。通過該過程創(chuàng)建了雜交瘤細胞系,。通過將脾臟中的單個B細胞融合并培養(yǎng)到它們自己的雜交瘤中,可以產生所有產生相同特異性抗體的B細胞的單一培養(yǎng)物,。
特定的克隆號碼被分配給篩選產生單克隆抗體的每個雜交瘤,,以便可以識別特定的抗體和它結合的特定表位。B細胞將單克隆抗體分泌到細胞培養(yǎng)基中,。在這里,,單抗被提取出來用于進一步的測試和純化。單克隆抗體雜交瘤克隆的創(chuàng)建提供了穩(wěn)定的可再生抗體來源,,確保每批與前一批相同,。為了制造一種分泌富含抗體的液體的腫瘤,稱為腹水,,也可以將雜交瘤注射到小鼠的腹腔中用于單抗的產生,。
鼠抗地塞米松單克隆抗體的最佳用途:
1、檢測特定抗原
2,、檢測蛋白質家族的單個成員
3,、在實驗/批次之間創(chuàng)建一致的結果
4、染色背景較少的細胞——非常適合免疫組織化學,、免疫細胞化學和免疫熒光實驗
5,、量化蛋白質表達(例如流式細胞術或熒光激活細胞分選)
6、檢測分子構象的變化
7,、檢測磷酸化狀態(tài)的變化
8,、檢測X射線晶體學的目標
9、創(chuàng)建缺乏特定細胞類型的動物模型
10,、免疫療法
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