為了制造鼠抗地塞米松單克隆抗體,,首先將免疫抗原注射到宿主動(dòng)物中。一旦免疫原引起免疫反應(yīng),,就會(huì)從脾臟中提取B細(xì)胞并與骨髓瘤細(xì)胞(癌癥B細(xì)胞)融合,。健康的脾細(xì)胞不會(huì)在細(xì)胞培養(yǎng)中無限期地存活,,因此進(jìn)行這種融合過程以制造永生細(xì)胞系。通過該過程創(chuàng)建了雜交瘤細(xì)胞系,。通過將脾臟中的單個(gè)B細(xì)胞融合并培養(yǎng)到它們自己的雜交瘤中,,可以產(chǎn)生所有產(chǎn)生相同特異性抗體的B細(xì)胞的單一培養(yǎng)物。
特定的克隆號(hào)碼被分配給篩選產(chǎn)生單克隆抗體的每個(gè)雜交瘤,,以便可以識(shí)別特定的抗體和它結(jié)合的特定表位,。B細(xì)胞將單克隆抗體分泌到細(xì)胞培養(yǎng)基中。在這里,,單抗被提取出來用于進(jìn)一步的測試和純化,。單克隆抗體雜交瘤克隆的創(chuàng)建提供了穩(wěn)定的可再生抗體來源,確保每批與前一批相同,。為了制造一種分泌富含抗體的液體的腫瘤,,稱為腹水,也可以將雜交瘤注射到小鼠的腹腔中用于單抗的產(chǎn)生,。
鼠抗地塞米松單克隆抗體的最佳用途:
1,、檢測特定抗原
2、檢測蛋白質(zhì)家族的單個(gè)成員
3,、在實(shí)驗(yàn)/批次之間創(chuàng)建一致的結(jié)果
4,、染色背景較少的細(xì)胞——非常適合免疫組織化學(xué),、免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫熒光實(shí)驗(yàn)
5,、量化蛋白質(zhì)表達(dá)(例如流式細(xì)胞術(shù)或熒光激活細(xì)胞分選)
6、檢測分子構(gòu)象的變化
7,、檢測磷酸化狀態(tài)的變化
8,、檢測X射線晶體學(xué)的目標(biāo)
9、創(chuàng)建缺乏特定細(xì)胞類型的動(dòng)物模型
10,、免疫療法
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