T2毒素(T2)是由多種鐮刀菌產(chǎn)生的一種霉菌毒素,。主要污染小麥、大麥,、玉米等糧食作物及其制品,,對(duì)人類健康及畜牧業(yè)構(gòu)成了較大危害。T-2毒素主要影響血液,,肝臟,,腎臟,胰腺肌肉及淋巴細(xì)胞的功能,,T-2毒素中毒后的一般臨床癥狀為厭食,、嘔吐、腹瀉,、生長(zhǎng)停滯,、繁殖和神經(jīng)機(jī)能障礙等。
T2 毒素免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的T2毒素,,從而對(duì)T2毒素樣品起到非常針對(duì)性的純化作用,,過(guò)柱凈化后的樣品液可直接用于液相進(jìn)行T2毒素含量的檢測(cè)。親和柱與HPLC配合使用可達(dá)到快速測(cè)定的目的,,以改善信噪比,,可提高檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度,。
T2 毒素免疫親和柱測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),抗體連接在柱體內(nèi),,樣品經(jīng)過(guò)離心,、脫脂后,緩慢的通過(guò)免疫親和柱,,在免疫親和柱內(nèi)毒素與抗體結(jié)合,,之后洗滌免疫親和柱除去沒(méi)有被結(jié)合的其他無(wú)關(guān)物質(zhì)。用甲醇洗脫T2毒素,,然后注入到分析儀器中用于檢測(cè),。
T2 毒素免疫親和柱的操作程序:
1.取出免疫親和層析柱,將上方塞子取出斜剪斷,,再插回親和柱上,;
2.將柱子與泵流操作架上的玻璃針筒連接固定,處理后的溶液上樣,;
3.去掉親和柱下方堵頭,,調(diào)節(jié)開(kāi)關(guān),使液體以1d/s的速度流出,;
4.待液體排干后,,更換新玻璃針筒,用10mL水溶液洗滌2次,,流速2d/s,;
5.待液體排干后,更換新玻璃針筒,,上樣1mL甲醇,,用樣品瓶/玻璃試管接洗脫液,流速1d/s,;
5.洗脫后液體可用于檢測(cè),。
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