鼠抗T2-毒素單克隆抗體是由多種鐮刀菌產(chǎn)生的一種霉菌毒素。主要污染小麥,、大麥,、玉米等糧食作物及其制品，對人類健康及畜牧業(yè)構(gòu)成了較大危害,。T2-毒素主要影響血液,，肝臟,，腎臟，胰腺肌肉及淋巴細(xì)胞的功能,，T2-毒素中毒后的一般臨床癥狀為厭食,、嘔吐、腹瀉,、生長停滯,、繁殖和神經(jīng)機(jī)能障礙等。該抗體可運(yùn)用于ELISA,、膠體金,、免疫親和柱層析等免疫檢測,。
鼠抗T2-毒素單克隆抗體的常見問題：
1.包被抗體或抗原不適,，易產(chǎn)生陽性值較小，或產(chǎn)生變異,，即跳管現(xiàn)象,。
2.用抗血清不純化，或純化程度太低的抗體包被,，則陽性值較小,，或沒有陽性梯度。
3.封閉不好或標(biāo)記物過濃可產(chǎn)生對照值較高,。
制備并鑒定抗T-2毒素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株,，以期為T-2毒素的快速檢測提供有力的抗體工具。方法：采用琥珀酸酐法將T-2毒素活化為T-2HS,T-2HS在DCC與NHS作用下與牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)偶聯(lián)合成*抗原,。以T-2HS-BSA為抗原,，免疫BALB/c小鼠，用ELISA篩選,、建立分泌抗T-2毒素抗體的雜交瘤細(xì)胞株,。測定單抗免疫球蛋白亞類及單抗效價，用間接競爭法檢測單克隆抗體細(xì)胞株的特異性,。結(jié)果：建立了1株穩(wěn)定分泌抗T-2毒素抗體的雜交瘤細(xì)胞株T-1B3,，該細(xì)胞株所分泌的單隆抗體Ig亞類為IgG1，ELISA檢測結(jié)果表明抗T-2毒素抗體可以與T-2毒素發(fā)生特異性反應(yīng),，工作濃度為1:6.5×104,IC50為3.6ng/ml,。該抗體與HT-2毒素的交叉反應(yīng)為65.9%,與黃曲霉毒素?zé)o交叉。結(jié)論：制備出能分泌具有較高特異性和親和力的抗T-2毒素單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,。
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