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• 將所有所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,，待其*回升至室溫后方可使用,，根據(jù)體積大小不同取出回溫的時(shí)間從1小時(shí)~2小時(shí)。注意每種液體試劑使用前均須搖勻,。
•  按標(biāo)準(zhǔn)品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔,。
•  加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、抗體：加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品50µL 到對(duì)應(yīng)的微孔中,，加入氟苯尼考抗體50µL/孔,，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)20min,。
•  洗板：小心揭開(kāi)蓋板膜,，將孔內(nèi)液體甩干，加入洗滌工作液300 µL/孔,，每次靜置20s,，甩去孔內(nèi)液體，重復(fù)洗滌3次,，后一次用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破）,。
• 加酶標(biāo)物：加入氟苯尼考酶標(biāo)物100 µL/孔，輕輕振蕩混勻,，用蓋板膜蓋板后置37℃避光孵育20 min,。
• 甩干孔內(nèi)液體，重復(fù)洗板3次,，后一次用吸水紙拍干,。
• 顯色：加入底物液A液50 µL/孔，再加底物液B液50 µL/孔,，輕輕振蕩混勻,，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)10min。
• 測(cè)定：加入終止液50µL/孔,，用酶標(biāo)儀立即  測(cè)定450/630nm處的吸光度值,。
  

  注意事項(xiàng)
  ① 根據(jù)體積大小不同取出回溫的時(shí)間從1小時(shí)~3小時(shí)，體積15毫升以上的優(yōu)先從冷藏環(huán)境取出 回溫。
  ②  洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作,。
  ③ 反應(yīng)終止液為2M硫酸,，避免接觸皮膚。
  ④不使用過(guò)了有效期的試劑盒,，不交換使用不同批號(hào)的試劑,。
  ⑤ 0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì),。
  ⑥ 在加入底物液A液和底物液B液后,，一般顯色    時(shí)間為10min即可。若顏色較淺,，可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到15-20min,，反之則減短反應(yīng)時(shí)間。
  ⑦ 底物液B液長(zhǎng)期使用變?yōu)闇\藍(lán)色時(shí),，請(qǐng)放心使用,，不影響檢測(cè)結(jié)果。