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（一）操作室厭氧環(huán)境形成
1）按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內(nèi)放入兩個(gè)五毒塑料袋,。
2）混合氣瓶,、氮?dú)馄枯斎雺毫φ{(diào)整，調(diào)節(jié)減壓閥,，使輸入壓力為0.1Mpa
3）打開設(shè)備后配,，電源開關(guān)后，按控制牌上的總電源鍵,，使設(shè)備通電,。
4）操作室放入1000g鈀粒（密封）和500g干燥劑，并放入美蘭指示條,。
5）關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,，并抽真空校驗(yàn)。（按控制面牌上真空泵鍵,，按一下開,，再按一下關(guān)）
6）操作室內(nèi)*次置換（氮?dú)庵脫Q）：
（1）先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口,，另一個(gè)插入塑料袋。
（2）接通氮?dú)膺M(jìn)氣路,，打開操作室氮?dú)饪刂崎y,，使兩只塑料袋充足氮?dú)夂螅P(guān)閉電磁閥,，然后扎緊袋口,。
（3）把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
（4）把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸的放于操作室內(nèi)，至全部防除
7）操作室第二次置換（氮?dú)庵脫Q）重復(fù)一次沖氮過程,，取樣室先抽真空,，并注意隨時(shí)按排氣閥關(guān)閉排氣。
8）操作室第三次置換（混合氣體置換） （混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10% CO2/15%）
（1）調(diào)換氣路打開操作室混合氣閥進(jìn)氣,，沖氣時(shí)取樣室先抽真空,，并注意隨時(shí)按排氣閥關(guān)閉排氣。
（2）混合氣充滿塑料袋后,，關(guān)閉電磁閥,，并打開混合氣限流閥，使混合氣經(jīng)過穩(wěn)流器,、流量計(jì),、調(diào)整流量計(jì)，流量為每分鐘10毫升左右,。
（3）把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi),。
（4）通過三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極為量狀態(tài)
9）操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,，接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,，并在厭氧指示條反應(yīng)區(qū)上滴一點(diǎn)潔凈水，1-2小時(shí)后,，觀察其變色情況,，反應(yīng)部分深藍(lán)色變?yōu)闇\藍(lán)為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境。
注：1指示條可反復(fù)使用,，2 不可接觸蘭色反應(yīng)區(qū)3包春在密封管內(nèi),，防止在干燥處,。10紫外線滅菌燈,，室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理，滅菌時(shí)間自定,。
（二）菌種的置入和培養(yǎng)
1）檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之,。
2）打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外們,。
3）取樣室充氮置換三次過程,，先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa）以上停,，然后打開取樣室氧氣閥進(jìn)氣，使指針回復(fù)零位,，關(guān)掉閥,。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束。
4）如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù),。
5）取樣室外門開啟,、關(guān)緊后，再抽低真空度100毫米汞柱（13Kpa）檢驗(yàn),。
6）厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件
（1）每天在操作室內(nèi)放入美蘭指示條觀察,，如不能正常就必須重新?lián)Q氣。
（2）要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,。使補(bǔ)進(jìn)的氮?dú)饽芎臀⒘康牡Y(jié)合通過催化吸收,，保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài)，補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右,。
（3）.連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行一天,，更換一次除氧劑和干燥劑。（換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內(nèi),，干燥2－3小時(shí)可使其復(fù)原）
7）接種棒滅菌器的應(yīng)用：
（1）隨時(shí)用鎳?yán)与姛峤z使電極短路而變赤熱以進(jìn)行殺菌（接種棒）,。
（2）熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。
8）操作室理的培養(yǎng)箱理的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制,。
（三）注意事項(xiàng)
1．儀表盡可能地安裝于空氣清靜,，溫度變化較小的地方。
2．開機(jī)前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器,、儀表的說明書,、掌握正確的使用方法。
3．培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境后放入,。
4．如發(fā)生故障（停氣等原因）操作室內(nèi)仍可保持12小時(shí)厭氧狀態(tài),。（超過12小時(shí)則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理）。
5．經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象,。
6．調(diào)換氣瓶時(shí),，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體
7．真空泵按要求使用,，定期檢查加油,。
8．停止使用，關(guān)閉總電源鍵,，及設(shè)備后部的電源開關(guān)
（四）常見故障及處理
| 現(xiàn)象 | 原理 | 處理 |
| 1,、無電源 | 1、插頭未插或短線 | 1,、插好插頭 |
| 2,、熔斷器開路 | 2,、更換同型號熔絲管 | |
| 3、電源開關(guān)壞 | 3,、更換電源開關(guān) | |
| 2,、培養(yǎng)箱不開蓋 | 1、設(shè)定溫度低 | 1,、調(diào)整設(shè)定溫度 |
| 2,、探頭壞 | 2、更探頭 | |
| 3,、操作室,、取樣室漏氣 | 1、密封不好 | 1,、用肥皂水校漏后用704密封 |
| 2,、年久橡皮圈老化 | 2、更換橡皮圈 | |
| 4,、氣路不通 | 1,、氣閥壞 | 1、更換氣閥 |
| 2,、皮管漏氣或脫落 | 2,、更換皮管 | |
| 3、氣瓶氣用完 | 3,、更換氣體 | |
| 5,、燈不亮 | 1、起輝器或燈不亮 | 1,、更換起輝器或燈管 |
| 2,、整流器燒壞 | 2、更換整流器 |
