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(一)操作室厭氧環(huán)境形成
1)按使用要求放置好必要的配件和器具,,并向操作室內放入兩個五毒塑料袋,。
2)混合氣瓶、氮氣瓶輸入壓力調整,,調節(jié)減壓閥,,使輸入壓力為0.1Mpa
3)打開設備后配,電源開關后,,按控制牌上的總電源鍵,,使設備通電。
4)操作室放入1000g鈀粒(密封)和500g干燥劑,,并放入美蘭指示條,。
5)關緊取樣室內外門,并抽真空校驗,。(按控制面牌上真空泵鍵,,按一下開,再按一下關)
6)操作室內*次置換(氮氣置換):
(1)先用橡皮管插入操作室內進氣口,,另一個插入塑料袋,。
(2)接通氮氣進氣路,打開操作室氮氣控制閥,,使兩只塑料袋充足氮氣后,,關閉電磁閥,,然后扎緊袋口。
(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
(4)把塑料袋內氮氣漸漸的放于操作室內,,至全部防除
7)操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次沖氮過程,,取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關閉排氣,。
8)操作室第三次置換(混合氣體置換) (混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10% CO2/15%)
(1)調換氣路打開操作室混合氣閥進氣,,沖氣時取樣室先抽真空,并注意隨時按排氣閥關閉排氣,。
(2)混合氣充滿塑料袋后,,關閉電磁閥,并打開混合氣限流閥,,使混合氣經過穩(wěn)流器,、流量計、調整流量計,,流量為每分鐘10毫升左右,。
(3)把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。
(4)通過三次換氣后,,操作室內氣體含氧量已處于極為量狀態(tài)
9)操作室內打開鈀粒除氧劑,,接通除氧催化器電源進行催化除氧,并在厭氧指示條反應區(qū)上滴一點潔凈水,,1-2小時后,,觀察其變色情況,反應部分深藍色變?yōu)闇\藍為操作室內達到厭氧環(huán)境,。
注:1指示條可反復使用,,2 不可接觸蘭色反應區(qū)3包春在密封管內,,防止在干燥處,。10紫外線滅菌燈,室內進行滅菌處理,,滅菌時間自定,。
(二)菌種的置入和培養(yǎng)
1)檢查取樣室內門并關緊之。
2)打開取樣室外門,,將菌種放入取樣室后即關上外們,。
3)取樣室充氮置換三次過程,先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,,然后打開取樣室氧氣閥進氣,,使指針回復零位,關掉閥,。取樣室充氮置換三次過程結束,。
4)如選定真空度較低就需要增加置換的次數。
5)取樣室外門開啟、關緊后,,再抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)檢驗,。
6)厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件
(1)每天在操作室內放入美蘭指示條觀察,如不能正常就必須重新?lián)Q氣,。
(2)要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,。使補進的氮氣能和微量的氮結合通過催化吸收,保證了室內厭氧狀態(tài),,補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右,。
(3).連續(xù)培養(yǎng)運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑,。(換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內,,干燥2-3小時可使其復原)
7)接種棒滅菌器的應用:
(1)隨時用鎳烙電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌(接種棒)。
(2)熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉熔蠟,。
8)操作室理的培養(yǎng)箱理的培養(yǎng)箱內的溫度可任意選擇和控制,。
(三)注意事項
1.儀表盡可能地安裝于空氣清靜,溫度變化較小的地方,。
2.開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器,、儀表的說明書、掌握正確的使用方法,。
3.培養(yǎng)物放入必須是在操作室內達到厭氧環(huán)境后放入,。
4.如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內仍可保持12小時厭氧狀態(tài)。(超過12小時則根據需要把培養(yǎng)物取出另作處理),。
5.經常注意氣路有無漏氣現象,。
6.調換氣瓶時,注意要扎緊氣管,,避免流入含氧氣體
7.真空泵按要求使用,,定期檢查加油。
8.停止使用,,關閉總電源鍵,,及設備后部的電源開關
(四)常見故障及處理
現象 | 原理 | 處理 |
1、無電源 | 1,、插頭未插或短線 | 1,、插好插頭 |
2、熔斷器開路 | 2,、更換同型號熔絲管 | |
3,、電源開關壞 | 3、更換電源開關 | |
2,、培養(yǎng)箱不開蓋 | 1,、設定溫度低 | 1,、調整設定溫度 |
2、探頭壞 | 2,、更探頭 | |
3,、操作室、取樣室漏氣 | 1,、密封不好 | 1,、用肥皂水校漏后用704密封 |
2、年久橡皮圈老化 | 2,、更換橡皮圈 | |
4,、氣路不通 | 1、氣閥壞 | 1,、更換氣閥 |
2,、皮管漏氣或脫落 | 2、更換皮管 | |
3,、氣瓶氣用完 | 3,、更換氣體 | |
5、燈不亮 | 1,、起輝器或燈不亮 | 1,、更換起輝器或燈管 |
2、整流器燒壞 | 2,、更換整流器 |