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當(dāng)前位置:拓赫機(jī)電科技(上海)有限公司>>技術(shù)文章>>高通量破碎動植物組織和微生物
破碎大量樣品、低溫破碎大量樣品,、破碎堅(jiān)硬或韌性較強(qiáng)的樣品時,人工手動研磨就成了實(shí)驗(yàn)猿的噩夢,。當(dāng)然,也有很多實(shí)驗(yàn)猿已經(jīng)嘗試過市面一些研磨機(jī)/超聲波粉碎機(jī),,發(fā)現(xiàn)自己那頑固的樣品依然無法被破碎/破碎過程損壞了目標(biāo)成分而十分心塞,。
分享個高通量破碎動植物組織和微生物的方法,別逗,,當(dāng)然不是靠徒手研磨能做到的,,必須入手個神器——上海凈信的tissuelyser系列和JXFSTPRP系列多樣品組織研磨機(jī)。對于動植物組織和微生物,,包括一些難以破碎的組織樣品,,都可以使用這個研磨機(jī)對其進(jìn)行粉碎。
特別地,,一些尤其堅(jiān)硬/韌性比較強(qiáng)的樣品,,或要求維持低溫條件進(jìn)行破碎提取的樣品,需要結(jié)合液氮進(jìn)行研磨,,如:皮膚,、硬骨骼、軟骨,、血管,、結(jié)締組織、種子等,;使用普通機(jī)械研磨方法,,很難既保證研磨破碎效果又保證樣品一直處于低溫狀態(tài),尤其是提取RNA,、酶等對溫度敏感的物質(zhì)時,,低溫狀態(tài)的控制顯得尤為關(guān)鍵。入手一臺上海凈信的多樣品組織研磨機(jī),,這些都不再是問題了,。看招:
注:由于樣品的具體差異及實(shí)驗(yàn)要求的不同,,下文數(shù)據(jù)部分請咨詢廠家,。
*部分 破碎動物組織
1)樣品:豬肌肉組織
2)儀器: Tissuelyser多樣品組織研磨機(jī)(品牌:上海凈信);
耗材:***毫升離心管和直徑***毫米的研磨鋼珠
3)步驟:
a.取***克左右肌肉組織樣品,,均勻地剪切成少量樣品塊,,分別放入若干***毫升的研磨離心管中。
b.每個試管中放入***顆直徑***毫米的研磨鋼珠和800μL PBS裂解液,,分別蓋緊管蓋后,,置入24孔研磨適配器中,再將適配器固定在研磨機(jī)中,。
c.將Tissuelyser多樣品組織研磨機(jī)的參數(shù)設(shè)置為***赫茲,,研磨***秒,,啟動研磨器。
d.研磨停止后,,拿出研磨離心管,,旋開管蓋,取出研磨好的肌肉組織樣品,。
4)結(jié)果:
研磨后的效果如圖1,,豬肌肉組織成很細(xì)膩的泥漿狀,說明Tissuelyser多樣品組織研磨機(jī)對豬肉組織的研磨效果良好,。
圖1 豬肌肉研磨對比
第二部分 破碎植物組織
1)樣品:水稻葉片
2)儀器: Tissuelyser多樣品組織研磨機(jī)(品牌:上海凈信);
耗材:***毫升離心管和直徑***毫米的研磨鋼珠
3)步驟:
a.取***克左右葉片組織樣品,,均勻地剪切成少量樣品塊,,分別放入若干***毫升的研磨離心管中。
b.每個試管中放入***顆直徑***毫米的研磨鋼珠,,分別蓋緊管蓋后,,置入24孔研磨適配器中,再將適配器固定在研磨機(jī)中,。
c.將Tissuelyser多樣品組織研磨機(jī)的參數(shù)設(shè)置為***赫茲,,研磨***秒,啟動研磨器,。
d.研磨停止后,,拿出研磨離心管,旋開管蓋,,取出研磨好的葉片組織樣品,。
4)結(jié)果:
研磨后的效果如圖2,葉片組織成很細(xì)膩的泥漿狀,,說明Tissuelyser多樣品組織研磨機(jī)對葉片組織的研磨效果良好,。順帶附上研磨黃豆(堅(jiān)硬的植物種子)的研磨對比圖。
圖2 水稻葉片研磨對比
圖3 黃豆研磨對比
第三部分 結(jié)合液氮使用凈信tissuelyser研磨機(jī)
當(dāng)樣品死活無法破碎/樣品傲嬌要低溫環(huán)境時,,上海凈信Tissuelyser多樣品組織研磨機(jī)+液氮=問題輕松解決,。以血管和植物葉片為例,具體操作方法如下:
血管:
取0.1克新鮮血管,,用剪刀剪成若干小塊,,然后放入2毫升離心管中,加入1顆6mm研磨鋼珠,,蓋上管蓋,。將整個試管放入液氮中冷凍1分鐘左右或直到液氮不沸騰,然后放入機(jī)器處理30秒鐘,。取出樣品管可見樣品被破碎成乳白色粉末,,然后加入提取緩沖液,,可以進(jìn)行接下來的后續(xù)提取,加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直處于-20℃以下,。
葉片:
取0.2克植物葉片,,清潔葉片表面后放入離心管中,加入1顆直徑5mm不銹鋼研磨鋼珠,,蓋上管蓋,。將整個試管和適配器放入液氮中冷凍1分鐘左右或直到液氮不沸騰,然后取出放入研磨機(jī)器中機(jī)器處理30秒鐘,。取出樣品管可見葉片被破碎成綠色粉末,,然后加入提取緩沖液,進(jìn)行接下來的后續(xù)提取即可,,加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直處于-20℃以下,。
后記
想入手這個神器,但又對研磨效果有所猶疑的小伙伴,,現(xiàn)在上海凈信部分研磨機(jī)產(chǎn)品可申請?jiān)囉?,是時候下手了。激動人心的還有,,近期研磨機(jī)好價,,試用爽了直接入手一臺也是毫不含糊的。詳情可致電或,,亦可瀏覽http://www.tissuelyser,。。com/了解更多,。
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