破碎大量樣品,、低溫破碎大量樣品,、破碎堅硬或韌性較強的樣品時，人工手動研磨就成了實驗猿的噩夢,。當然,，也有很多實驗猿已經(jīng)嘗試過市面一些研磨機/超聲波粉碎機，發(fā)現(xiàn)自己那頑固的樣品依然無法被破碎/破碎過程損壞了目標成分而十分心塞,。

       分享個高通量破碎動植物組織和微生物的方法,，別逗,，當然不是靠徒手研磨能做到的，必須入手個神器——上海凈信的tissuelyser系列和JXFSTPRP系列多樣品組織研磨機,。對于動植物組織和微生物,，包括一些難以破碎的組織樣品，都可以使用這個研磨機對其進行粉碎,。

    特別地,，一些尤其堅硬/韌性比較強的樣品，或要求維持低溫條件進行破碎提取的樣品,，需要結合液氮進行研磨,，如：皮膚、硬骨骼,、軟骨、血管,、結締組織,、種子等；使用普通機械研磨方法,，很難既保證研磨破碎效果又保證樣品一直處于低溫狀態(tài),，尤其是提取RNA、酶等對溫度敏感的物質(zhì)時,，低溫狀態(tài)的控制顯得尤為關鍵,。入手一臺上海凈信的多樣品組織研磨機，這些都不再是問題了,?？凑校?/span>

注：由于樣品的具體差異及實驗要求的不同，下文數(shù)據(jù)部分請咨詢廠家,。

*部分 破碎動物組織

1）樣品：豬肌肉組織

2）儀器： Tissuelyser多樣品組織研磨機（品牌：上海凈信）,；

耗材：***毫升離心管和直徑***毫米的研磨鋼珠

3）步驟：

a.取***克左右肌肉組織樣品，均勻地剪切成少量樣品塊,，分別放入若干***毫升的研磨離心管中,。

b.每個試管中放入***顆直徑***毫米的研磨鋼珠和800μL PBS裂解液，分別蓋緊管蓋后,，置入24孔研磨適配器中,，再將適配器固定在研磨機中。

c.將Tissuelyser多樣品組織研磨機的參數(shù)設置為***赫茲,，研磨***秒,，啟動研磨器。

d.研磨停止后,，拿出研磨離心管,，旋開管蓋,，取出研磨好的肌肉組織樣品。

4）結果：

研磨后的效果如圖1,，豬肌肉組織成很細膩的泥漿狀,，說明Tissuelyser多樣品組織研磨機對豬肉組織的研磨效果良好。

圖1 豬肌肉研磨對比

第二部分 破碎植物組織

1）樣品：水稻葉片

2）儀器： Tissuelyser多樣品組織研磨機（品牌：上海凈信）,；

耗材：***毫升離心管和直徑***毫米的研磨鋼珠

3）步驟：

a.取***克左右葉片組織樣品,，均勻地剪切成少量樣品塊，分別放入若干***毫升的研磨離心管中,。

b.每個試管中放入***顆直徑***毫米的研磨鋼珠,，分別蓋緊管蓋后，置入24孔研磨適配器中,，再將適配器固定在研磨機中,。

c.將Tissuelyser多樣品組織研磨機的參數(shù)設置為***赫茲，研磨***秒,，啟動研磨器,。

d.研磨停止后，拿出研磨離心管,，旋開管蓋,，取出研磨好的葉片組織樣品。

4）結果：

研磨后的效果如圖2,，葉片組織成很細膩的泥漿狀,，說明Tissuelyser多樣品組織研磨機對葉片組織的研磨效果良好。順帶附上研磨黃豆（堅硬的植物種子）的研磨對比圖,。

圖2 水稻葉片研磨對比

圖3 黃豆研磨對比

第三部分 結合液氮使用凈信tissuelyser研磨機

    當樣品死活無法破碎/樣品傲嬌要低溫環(huán)境時,，上海凈信Tissuelyser多樣品組織研磨機+液氮=問題輕松解決。以血管和植物葉片為例,，具體操作方法如下：

 血管：

    取0.1克新鮮血管,，用剪刀剪成若干小塊，然后放入2毫升離心管中,，加入1顆6mm研磨鋼珠,，蓋上管蓋。將整個試管放入液氮中冷凍1分鐘左右或直到液氮不沸騰,，然后放入機器處理30秒鐘,。取出樣品管可見樣品被破碎成乳白色粉末，然后加入提取緩沖液,，可以進行接下來的后續(xù)提取,，加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直處于-20℃以下。

 葉片：

    取0.2克植物葉片，清潔葉片表面后放入離心管中,，加入1顆直徑5mm不銹鋼研磨鋼珠,，蓋上管蓋。將整個試管和適配器放入液氮中冷凍1分鐘左右或直到液氮不沸騰,，然后取出放入研磨機器中機器處理30秒鐘,。取出樣品管可見葉片被破碎成綠色粉末，然后加入提取緩沖液,，進行接下來的后續(xù)提取即可,，加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直處于-20℃以下。

后記

       想入手這個神器,，但又對研磨效果有所猶疑的小伙伴,，現(xiàn)在上海凈信部分研磨機產(chǎn)品可申請試用，是時候下手了,。激動人心的還有,，近期研磨機好價，試用爽了直接入手一臺也是毫不含糊的,。詳情可致電或,，亦可瀏覽http://www.tissuelyser。,。ｃｏｍ/了解更多。