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Tissuelyser-48擬南芥或水稻穗RNA快速提取步驟兩種方法

時(shí)間:2012-10-11閱讀:3037
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*種 濕磨法

1.取打碎機(jī)適配器于-80°冷凍約15min,。
2.取一指節(jié)長(zhǎng)度的花序,,好帶上一片葉子,,(材料量可多可少,,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),,放入國(guó)產(chǎn)2ml EP管中,, 加一粒鋼珠,液氮速凍,。之后用鑷子取出,,快速加入適配器中。(好用國(guó)產(chǎn)的EP管即可,,進(jìn)口的管子液氮凍過(guò)后,,容易裂)
3.打碎15s,50HZ,。(水稻嫩葉為,。45S,60HZ 老葉為,,70S 60HZ)
4.將材料再次放入液氮中,。
5.用磁鐵吸出鋼珠,加入1ml Trizol,,余下步驟即正常的RNA提取步驟,。

第二種 干磨法

1.取一指節(jié)長(zhǎng)度的花序(材料量可多可少,,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),放入國(guó)產(chǎn)2ml EP管中,,加一粒鋼珠,,400ul Trizol。
2.打碎1min 50HZ (水稻嫩葉為,。45S,,60HZ 老葉為,70S 60HZ) ,。
3.吸出鋼珠,,補(bǔ)600ul Trizol。
4.余下步驟即正常的RNA提取步驟,。
注意:鋼珠遇到Trizol 會(huì)被溶解一部分,,所以之后的提取液是黃色的(有鐵離子),不必在意,,之后異丙醇那一步鐵離子會(huì)和上清一起別棄掉,。

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