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拓赫機電科技(上海)有限公司

Tissuelyser-48擬南芥或水稻穗RNA快速提取步驟兩種方法

時間:2012-10-11閱讀:3115
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*種 濕磨法

1.取打碎機適配器于-80°冷凍約15min,。
2.取一指節(jié)長度的花序,,好帶上一片葉子,,(材料量可多可少,,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),,放入國產2ml EP管中,, 加一粒鋼珠,,液氮速凍。之后用鑷子取出,,快速加入適配器中,。(好用國產的EP管即可,進口的管子液氮凍過后,,容易裂)
3.打碎15s,,50HZ。(水稻嫩葉為,。45S,,60HZ 老葉為,70S 60HZ)
4.將材料再次放入液氮中,。
5.用磁鐵吸出鋼珠,,加入1ml Trizol,余下步驟即正常的RNA提取步驟,。

第二種 干磨法

1.取一指節(jié)長度的花序(材料量可多可少,,7d大小的苗地上部分也能提出RNA),放入國產2ml EP管中,,加一粒鋼珠,,400ul Trizol。
2.打碎1min 50HZ (水稻嫩葉為,。45S,,60HZ 老葉為,70S 60HZ) ,。
3.吸出鋼珠,,補600ul Trizol。
4.余下步驟即正常的RNA提取步驟,。
注意:鋼珠遇到Trizol 會被溶解一部分,,所以之后的提取液是黃色的(有鐵離子),不必在意,,之后異丙醇那一步鐵離子會和上清一起別棄掉,。

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