實驗?zāi)康模?/strong>此次實驗樣品為人全血DNA,；需要對生物DNA生物樣本需要打斷到150-300bp進行后續(xù)的測序建庫實驗，為得到這一片段長度下的樣本,，需進行梯度預(yù)實驗,。

　　實驗設(shè)備：高通量聲波基因組剪切儀 JXDNA-500PICO

　　樣品前處理實驗操作過程：

　　1.在實驗開始前，需要先提前準確好實驗超聲波剪切設(shè)備以及實驗所需應(yīng)用的耗材和若干的實驗樣品

　　2.將適配器放入水槽中,，再打開冷水機對其進行預(yù)冷直至4度

　　3.對生物樣本進行稀釋,，將其稀釋到同一濃度

　　4.把稀釋好的同一濃度的DNA樣本按照體積梯度將其投入樣品離心管內(nèi)，標好編號,，震蕩離心

　　5.把帶有樣品的離心管放入儀器的適配器內(nèi),，但要注意水平配平，盡量將樣品放置在適配器外圈

　　6.啟動儀器,，調(diào)節(jié)程序運行參數(shù),，設(shè)置好能量，工作時間,，間隙時間,，循環(huán)工作，總時長梯度為17min,，20min,，25min

　　7.待儀器程序運轉(zhuǎn)結(jié)束后，即可取出樣本,，進行電泳檢測

　　實驗操作注意事項：

　　1.同等條件下人體DNA樣本的打斷難度大于小鼠大于植物,，而不同的實驗樣品需單獨進行預(yù)實驗，不可混用實驗結(jié)果

　　2.注意樣品離心管內(nèi)的樣本體積,，需確保儀器內(nèi)水位要蓋住樣品

　　3.離心管需要配平,，適配器壓蓋禁止傾斜，避免樣本開蓋污染

　　4.冷水機需要提前打開預(yù)冷,，水流循環(huán)要調(diào)整穩(wěn)定不能過于激烈

　　樣品前處理實驗結(jié)果：

　　綜上結(jié)果可見,，樣品投入量能影響檢測熒光強度，超聲打斷時間能影響片段長度,。綜合下機樣品的片段長度和熒光強度,，以及片段集中性，選擇20μL打斷25min作為實驗條件,。

　　在高通量測序樣本制備過程中,，DNA片段化處理是一個核心步驟,。因此隨機、準確,、集中無偏差的DNA片段化是保證DNA文庫質(zhì)量和均一性的關(guān)鍵一步,。高通量聲波基因組剪切儀采用等溫、非接觸的方式對樣品進行打斷,、勻漿和混合,，為DNA片段化又提供了新的研究手段，進一步推動了分子生物學的研究發(fā)展,。