細胞的趨化性被描述為細胞向趨化劑的定向遷移,；趨化作用是無向的細胞遷移,，在細胞經(jīng)歷趨化作用時,，它們會因某種物質(zhì)而改變細胞的遷移速度但不會改變其遷移方向,。

　　開始實驗前需要確認的問題：為了正確設(shè)置趨化性測定,，需要先確認以下幾個重要問題,。

　　1.您打算研究哪種細胞類型？

　　了解您感興趣的細胞類型--包括培養(yǎng)基要求和遷移速度--對于后續(xù)的檢測計劃至關(guān)重要,。

　　2.所分析的細胞類型的遷移速度是多少,？

　　雖然有些細胞遷移速度較慢(如腫瘤細胞或成纖維細胞)，但其他類型的細胞(如白細胞)遷移速度非?？?。細胞遷移速度將決定實驗的持續(xù)時間和圖像之間所需的間隔。此外,，梯度穩(wěn)定性必須足夠高,，以適應(yīng)實驗的總持續(xù)時間。ibidi µ -Slide Chemotaxis 細胞趨化載玻片適用于慢速和快速遷移細胞的趨化性分析,。

　　3.培養(yǎng)基是什么,？

　　大多數(shù)細胞類型在含有胎牛血清(FCS)的培養(yǎng)基中培養(yǎng),，但它卻含有許多可以影響細胞遷移的因素，因此可能會改變趨化性測定的結(jié)果,。例如,，趨化劑對細胞遷移的影響可以被FCS誘導(dǎo)的影響所掩蓋。在開始測定之前逐漸降低培養(yǎng)基中的FCS濃度是克服這個問題的一種方法,。此外,，還開發(fā)了不含F(xiàn)CS的特殊無血清培養(yǎng)基。在開始測定之前,，必須測試每種感興趣細胞類型的最佳培養(yǎng)基成分,。

　　4.感興趣的細胞類型的最佳接種密度是多少？

　　接種密度取決于許多細胞因素,，例如增殖速率,、行為、形狀,、上皮或間充質(zhì)狀態(tài)以及對細胞與細胞接觸的依賴性,。此外，在確定最佳細胞接種密度時必須考慮實驗持續(xù)時間,。為了有足夠的可追蹤細胞,，開始實驗時密度不能太低。在實驗結(jié)束時,，單細胞應(yīng)該是清晰可定義和可追蹤的,。考慮到這些因素,，在開始趨化性測定之前,，應(yīng)分別確定每種細胞類型的最佳接種密度。

　　5.應(yīng)該進行多少次實驗,？

　　通常,，三到五次重復(fù)實驗足以從趨化組和相應(yīng)的對照組創(chuàng)建重要數(shù)據(jù)。每個實驗應(yīng)包含20-40個單細胞的跟蹤數(shù)據(jù),，這可以使用低放大倍率顯微鏡物鏡（例如5倍或10倍）來實現(xiàn),。

　　6.應(yīng)該進行2D或3D趨化性分析嗎？

　　大多數(shù)細胞自然嵌入3D矩陣中,。在趨化性測定過程中在2D環(huán)境中培養(yǎng)它們可能會改變它們的行為和遷移能力,。為了克服這個問題，可以將細胞嵌入模仿其自然環(huán)境的3D基質(zhì)中,，例如膠原蛋白,、基質(zhì)膠或其他水凝膠。而細胞趨化載玻片非常適合2D和3D實驗。

　　7.實驗中必須包括哪些對照,？

　　為了正確分析趨化性實驗,，至關(guān)重要的是包括不含任何趨化劑的陰性對照 (-/-)，以及整個室中含有趨化劑的陽性對照 (+/+),。

　　在使用細胞趨化載玻片時,，由于梯度以外的所有條件都是對稱的，因此需要較少的控制測量,。這允許相互獨立地分析趨化性和趨化運動,。在該實例中，趨化劑誘導(dǎo)癌細胞的趨化性和趨化運動,。