1.哪些特定應(yīng)用使用µ-Slide VI 0.1,？

如果實驗中的細(xì)胞數(shù)量有限(例如當(dāng)使用原代小鼠細(xì)胞時),，或者使用最少量的試劑做進(jìn)行免疫熒光，建議使用µ-Slide VI 0.1?,。對于灌注實驗,，µ-Slide VI 0.1?會產(chǎn)生-較-高-水-平的剪切應(yīng)力。

2. µ-Slide內(nèi)的流型是Y型湍流嗎,？

不是,，當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)流速和水性介質(zhì)時，在小通道中無法真正實現(xiàn)湍流特性。無量綱雷諾數(shù)(Re)用于表征不同的流型,。層流發(fā)生在低雷諾數(shù),，而湍流發(fā)生在高雷諾數(shù)。表明管道和生物容器中層流的臨界雷諾數(shù)是Re=2000,。雷諾數(shù)超過Re 4000,，最有可能代表湍流。即使在 µ-Slide y-shaped中流速非常高（60毫升/分鐘）,，雷諾數(shù)仍非常低,，約為Re=200，表明層流,。

3.多大的剪切應(yīng)力適合于滾動和粘附分析？

在滾動和粘附分析中,，應(yīng)該使用與內(nèi)皮細(xì)胞層的標(biāo)準(zhǔn)流動調(diào)節(jié)相同的參數(shù),。有兩件事需要考慮： 首先，在進(jìn)行滾動和粘附實驗之前,，內(nèi)皮細(xì)胞層應(yīng)該進(jìn)行幾天的流動調(diào)節(jié),。這個階段的剪切應(yīng)力可能不同于在滾動和粘附期間施加的剪切應(yīng)力。其次,，在粘附試驗中,，灌注培養(yǎng)基的速度也起作用?？赡苄枰淖兗羟袘?yīng)力,。此外，有必要測試最佳流速/剪切應(yīng)力,。

4.在進(jìn)行分析之前,，應(yīng)該對細(xì)胞層施加多長時間的剪切應(yīng)力？

細(xì)胞對機(jī)械剪切應(yīng)力的適應(yīng)性反應(yīng)可長達(dá)數(shù)天,。因此,，根據(jù)您正在研究的標(biāo)記，可能有必要在分析前對細(xì)胞層進(jìn)行長達(dá)幾天的調(diào)節(jié),。我們建議在長期實驗中測試感興趣的參數(shù),，以確定最佳的測量時間點。

5.應(yīng)該對內(nèi)皮細(xì)胞施加多大的剪切力,？

生理剪切應(yīng)力取決于感興趣的組織和血管類型,。根據(jù)文獻(xiàn)，人體內(nèi)的生理剪切應(yīng)力值在0至60dyn/cm2之間變化,。在開始實驗之前,，確定適用于所用細(xì)胞類型的相關(guān)剪切應(yīng)力范圍至關(guān)重要。

6.如何增加流動分析中的細(xì)胞數(shù)量？

將通道載玻片串聯(lián)到一個灌流裝置/流體單元中,，可以輕松地增加流式檢測中細(xì)胞的數(shù)量,。應(yīng)用說明書25（這是個鏈接2022-07-15發(fā)布的公眾號）提供了連接多個通道載玻片到一個流體單元的詳細(xì)方案。 此外,，將細(xì)胞播種到通道底部和頂部,，也可以增加通道中的細(xì)胞數(shù)量。

7.在開始流動之前,，細(xì)胞應(yīng)該附著多久,？

在流動開始之前，細(xì)胞必須緊密附著在通道載玻片底部,。附著時間取決于細(xì)胞類型,、培養(yǎng)基添加物和表面。例如,，在膠原涂層表面上使用HUVEC時,，附著時間只需半小時。之后,，就可以施加剪切應(yīng)力,。為了使細(xì)胞有機(jī)會適應(yīng)新的環(huán)境條件，建議逐步增加剪切應(yīng)力,。

8.硅珠如何再生,？

將硅膠珠加熱即可輕松再生。請按照ibidi泵系統(tǒng)的說明書中的方案進(jìn)行回收,。

9.灌注裝置多久可以重復(fù)使用一次,？

我們不建議重復(fù)使用灌注組件。每次實驗都使用一個新的灌注裝置,，可獲得最可復(fù)制和較-可-靠的結(jié)果,。您可以在ibidi泵系統(tǒng)說明書中找到有關(guān)滅菌和清潔的其他信息。

11.如何確保細(xì)胞獲得孵化后的空氣,？

ibidi泵系統(tǒng)的設(shè)置確保來自培養(yǎng)箱內(nèi)部的具有正確CO2濃度的無菌空氣驅(qū)動灌注,。有關(guān)詳細(xì)說明，請參見ibidi泵系統(tǒng)的說明書,。

12.如何計算通道載玻片中懸浮細(xì)胞的剪切應(yīng)力,？

在通道中通過液體時，壁面摩擦?xí)?dǎo)致流動速度呈拋物線形,。通道中心的流速將比壁面快,。剪切應(yīng)力僅在通道或管道的壁面上發(fā)生。因此,，只有附著在通道壁/底部的細(xì)胞才會經(jīng)歷剪切應(yīng)力,。通道中央的懸浮細(xì)胞將經(jīng)歷不同的流速，與靠近通道壁的細(xì)胞不同。因此,，對于懸浮細(xì)胞,，剪切速率是需要考慮的相關(guān)因素，而不是剪切應(yīng)力,。