摘要：全自動樣品快速研磨儀對水稻研磨葉片研磨實驗主要目的是滿足分子標(biāo)記輔助育種中基因型鑒定,、基因克隆,、測序的需要，本研究借用棉簽等具吸附功能的材料代替移液器,，依次直接在2種DNA提取液中操作,，建立了一種簡單,、快速,、環(huán)保的水稻葉片DNA提取方法,。結(jié)果表明，提取溶液通過PCR擴(kuò)增,，滿足基因擴(kuò)增對模板的要求,。

　　同時，對其進(jìn)行了靈敏度測試,，稀釋107倍仍然能夠擴(kuò)增出目標(biāo)片段,；最后通過PCR、克隆載體連接等分子生物學(xué)手段,，驗證此方法也滿足測序的需要,。本方法能夠在90s內(nèi)完成植物葉片DNA的提取，解決了目前植物基因組DNA提取方法需要離心機(jī)等昂貴特殊設(shè)備,、提取步驟繁鎖、提取過程中刺激味大,、提取時間長等問題,，有利于大規(guī)模開展分子標(biāo)記輔助育種中材料基因型的鑒定，具有簡單,、快速,、廉價,、環(huán)保等優(yōu)點。

　　實驗?zāi)康模?/strong>擬測試全自動樣品快速研磨儀對水稻葉片的前處理研磨效果

　　1.測試對象：上海凈信全自動樣品快速研磨儀,，型號為JXFSTPRP-24L

　　2.工作原理：樣品（水稻葉片）放入離心管中,，放入研磨球，通過研磨儀的高速上下振蕩帶動研磨珠進(jìn)行粉碎樣品,。

　　3.實驗器材：上海凈信全自動組織研磨儀主機(jī),，水稻葉片若干，離心管和不銹鋼研磨珠兩顆,，提取試劑

　　水稻葉片樣品前處理研磨實驗操作步驟：

　　一,、需要根據(jù)樣品量及樣品實驗研磨需求，去對組織研磨儀設(shè)備的程序參數(shù)的研磨頻率及研磨時間進(jìn)行設(shè)置

　　二,、需要把水稻葉片剪成小段后,，再放入凈信離心管中，再在離心管內(nèi)加入適量的氧化鋯珠和相應(yīng)提取試劑

　　三,、再把離心管放入機(jī)器的適配器中,，但需要注意對適配器的配平和緊固，再鎖蓋

　　四,、啟動設(shè)備,，即可開始程序的運轉(zhuǎn)研磨

　　五、待程設(shè)備程序停止運轉(zhuǎn)后,，即可完成樣品粉碎,，便可獲得磨后的樣品效果

　　水稻葉片樣品前處理研磨實驗效果：

　　研磨前后效果圖

　　注：全自動樣品快速研磨儀在針對樣品葉片的研磨時，需要盡可能的添加提取試劑,，讓樣品在實驗研磨過程中有液體的情況下,，可使樣品研磨效果會更加的充分。