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當(dāng)前位置:拓赫機電科技(上海)有限公司>>技術(shù)文章>>ibidi流體剪切力實驗|通道載玻片串連方法步驟
ibidi流體剪切力實驗應(yīng)用逐步說明了如何串聯(lián)連接多個Luer-Slides,。優(yōu)點是僅使用一個流體單元即可觀察和培養(yǎng)多個載玻片。當(dāng)使用相同規(guī)格的載玻片時,,載玻片中的流速是相同的,。也可以通過連接不同高度的載玻片來改變剪切速率。
本次介紹了兩個載玻片連接的過程,。但是它可以應(yīng)用于大量的載玻片,。
將一個塑料連接器插入通道載玻片的兩端(6厘米),以在載玻片之間連接起來,。下圖是在兩端帶有兩個配套的Luer公接頭的連接器管,。可用乙醇或高壓滅菌消毒接頭,。
*必須在無菌條件下執(zhí)行以下步驟,!
3. 播種細(xì)胞
· 準(zhǔn)備1.67 · 106 cells/ml.的細(xì)胞懸液?! ?/p>
· 將150 µl注入通道,。僅填充通道體積(圖1a)?! ?/p>
· 將帽蓋在Luer接頭上,,并將載玻片放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)半小時來固定細(xì)胞。
· 細(xì)胞固定后,,將兩邊儲液接口各加60 µl充滿,。
4. 連接載玻片
現(xiàn)在準(zhǔn)備載玻片,使細(xì)胞在通道中生長,,并向儲液池中填充60 µl無細(xì)胞培養(yǎng)基(請參見第3節(jié)),。
· 在連接之前,,將所有儲液器各加60 µl(圖1b),。
· 將連接器管的一個Luer適配器插入載玻片的一個母Luer適配器中(圖1c),?! ?/p>
· 將一些預(yù)備的培養(yǎng)基吸入注射器。倒轉(zhuǎn)注射器并將多余的空氣推出(圖1d),?! ?/p>
· 使用沒有氣泡的注射器在載玻片端口注入??赡軙行┮绯觯▓D1e),。
小心地將液體注入載玻片,,直到連接器管中充滿為止(圖1f)
圖1:(a)接種細(xì)胞時的用量,; (b)載玻片在連接之前已*填滿; (c)載玻片中插入連接管,; (d)無氣泡的注射器,; (e)將注射器插入載玻片一端; (f)用注射器推動介質(zhì)來填充連接器管道
· 當(dāng)連接器管道*充滿時(圖2a),,將其插入第二張載玻片的接口上(圖2b-d),。
· 如果要連接兩個以上的載玻片,,將第二個連接器管放在第二個載玻片空的另一端口上,,用注射器推入介質(zhì),依此類推,?! ?/p>
· 慢慢連接的所有載玻片將注射器從適配器上卸下(圖2e)?! ?/p>
· 要將載玻片連接到灌注套件,,兩個Luer容器必須在頂部填充培養(yǎng)基??捎眉埥聿寥ミ^多的培養(yǎng)基,。
圖2:(a)連接管已*充滿; (b-c)將連接器管插入第二載玻片的魯爾接頭上,; (d)帶有適配接頭管連接; (e)取下注射器,; (f)擦去溢出的介質(zhì),,并填充儲液罐以連接到灌注套件。
5. 連接到灌注裝置
將載玻片連接到灌注套件
圖片串聯(lián)安裝帶有兩個µ-Slides I Luer的一個流體單元,。
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