實驗地點：中科院生物物理所生物大分子國家重點實驗室

用戶：常文瑞組

實驗方法

1,、破碎前的準備：

   0.1g菌體（本實驗以0.1g菌體為例）,；

   直徑3號陶瓷珠,；

   研磨機（選用品牌上海凈信科技TS-24）,；

   預處理好的2ML研磨管,；

   模塊冷凍。
 

2,、研磨： 

   0.1g菌體,，5000r/min離心1 min后去上清,，加入等體積的玻璃珠，加入0.5ML PBS溶液,，放入預先冷凍好的模塊中,，放入上海凈信科技的研磨機中，調(diào)整頻率為60Hz,，震蕩時間60s.

  注：破菌效率隨著液體體積的增加而增加，液體體積達到100ul時開始達到大破菌效率,。

  附：陶瓷珠回收,，以下是方法：

      1、將含陶瓷珠的EP管,，放置在大燒杯中,，用自來水中浸泡2－3天。

      2,、用鑷子將陶瓷珠和細胞碎片等全部抖落到燒杯中,。靜置待玻璃珠沉淀后，輕輕將上面懸浮的細胞碎片倒掉,，在加水重懸陶瓷珠,。

      3、重復步驟2,，4－5次直到所有的細胞碎片都去除干凈,。

      4、加入適量的濃硝酸（將陶瓷珠全部覆蓋即可）,，浸泡過夜,。

      5、去離子水洗三次,，置烘箱中干燥即可,。