液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器,、泵,、進樣器、色譜柱,、檢測器,、記錄儀等幾部分組成。與經(jīng)典的液相色譜相比,，具有液相所用的固定相粒度?。ǎ担酰?１０ｕｍ）、傳質(zhì)快,、柱效高的優(yōu)勢,。近年來，在保健食品功效成分,、營養(yǎng)強化劑,、維生素類、蛋白質(zhì)的分離測定等應(yīng)用廣泛,。世界上約有８０％的有機化合物可以用ＨＰＬＣ來分析測定,。

液相色譜的分離過程 ＨＰＬＣ，借溶質(zhì)在兩相間分配系數(shù)、親和力,、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質(zhì)得以分離,。

液相色譜儀操作步驟：

1)過濾流動相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜,。
2)對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘,。
3)打開HPLC工作站(包括計算機軟件和色譜儀)，連接好流動相管道,，連接檢測系統(tǒng),。
4)進入HPLC控制界面主菜單，manual,，進入手動菜單,。
5)一段時間沒用，或者換了新的流動相,，需要先沖洗泵和進樣閥,。沖洗泵，直接在泵的出水口,，用針頭抽取,。沖洗進樣閥，需要在manual菜單下,，先purge,，再start，沖洗時速度不要超過10ml/min,。
6)調(diào)節(jié)流量,，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力,，流速越大,，壓力越大，一般不要超過2000,。injure,，選用合適的流速，on,，走基線,，觀察基線的情況。
7)設(shè)計走樣方法,。file,，選取selectusersandmethods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法,。若需建立一個新的方法,，newmethod,。選取需要的配件，包括進樣閥,，泵,，檢測器等，根據(jù)需要而不同,。選完后,，protocol。一個完整的走樣方法需要包括：a.進樣前的穩(wěn)流,，一般2-5分鐘,；b.基線歸零；c.進樣閥的loading-inject轉(zhuǎn)換,；d.走樣時間，隨不同的樣品而不同,。
8)進樣和進樣后操作,。選定走樣方法，start,。進樣,，所有的樣品均需過濾。方法走完后,，postrun,，可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等。全部樣品走完后,，再用上面的方法走一段基線,，洗掉剩余物。
9)關(guān)機時,，先關(guān)計算機,，再關(guān)液相色譜。