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厭氧培養(yǎng)箱的操作以及注意事項(xiàng)

一、操作室厭氧環(huán)境形成
　　1.按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋。
　　2.通電源開照明燈,，開控溫儀，調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度。
　　3.操作室內(nèi)放入1000g鈀粒（封閉）和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑（封閉）,。
　　4.關(guān)緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗(yàn),。
　　5.操作室內(nèi)*次置換（氮?dú)庵脫Q）：
　?。?）先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口，另一頭插入塑料袋,。
　?。?）接通氮?dú)膺M(jìn)氣路，打開氮?dú)饪刂崎y,，使二只塑料袋充足氮?dú)?，然后扎緊袋口,。
　　（3）把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊,。
　?。?）把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸地放于操作室內(nèi)，至全部放出,。
　　6.操作室第二次置換（氮?dú)庵脫Q）重復(fù)一次充氮過程,，并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。
　　7.操作室第三次置換（混合氣體置換）：
　?。ɑ旌蠚怏w配比為：N2:H2:CO2=85%:10%:5%）
　?。?）調(diào)換氣路打開混合氣道通閥門進(jìn)氣，充氣時要隨時腳踏開關(guān)開閉排氣,。
　?。?）混合氣充滿塑料袋后，關(guān)掉混合氣直通閥（三通閥）,，使混合氣經(jīng)過流量計輸入操作并調(diào)整流量計,，流量為每分鐘10毫升左右。
　?。?）把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi),。
　　（4）通過三次換氣后,，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài),。
　　8.操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,，一小時后打開美蘭指示劑（美蘭安瓶）觀察其變色情況,，不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境。
　　9.開紫外線滅菌燈,，室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理,。滅菌時間自定。
　　二,、菌種的置入和培養(yǎng)
　　1.檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊,。
　　2.打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門,。
　　3.取樣室充氮置換三次過程：先抽真空度500毫米汞柱   （66Kpa）以上停,然后人工打開氮?dú)忾y門進(jìn)氣,使指針回復(fù)零位后進(jìn)行下次操作,。
　　4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。
　　5.取樣室內(nèi)外門開啟,，關(guān)緊要抽低真空度100毫米汞柱（13Kpa）檢驗(yàn)及幫助操作,。
　　6. 厭氧培養(yǎng)箱 需要長期連續(xù)使用的條件：
　　（1）每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示劑觀察,，正常情況下使用,。如不正常就必須重新?lián)Q氣,。
　　（2）要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,，使補(bǔ)進(jìn)的氫氣能和微量的氧結(jié)合通過催化吸收,，保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài)，補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右,。
　?。?）連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行一天，更換一次除氧劑和干燥劑,。
　　7.接種棒滅菌器的應(yīng)用：
　?。?）隨時用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進(jìn)行殺菌（接種棒）
　?。?）熔蠟處可直接放上,，試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。
　　8.操作室里的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制,。
　　9.混合氣瓶,、氮?dú)馄枯敵鰤毫φ{(diào)整：調(diào)節(jié)減壓閥，使輸出壓力為0.1Mpa左右