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培養(yǎng)箱在實驗室設(shè)備中的用途

閱讀:443        發(fā)布時間:2019-12-16


培養(yǎng)箱在實驗室設(shè)備中的用途

     細胞培養(yǎng)箱所需的實驗室設(shè)備的種類和使用建議,,也有一定的標準和規(guī)范:細胞培養(yǎng)主要重點在于保持無菌操作,,避免微生物及其他有害因素的影響。
1,、顯微鏡:倒置式顯微鏡是細胞培養(yǎng)實驗室日常工作常規(guī)*設(shè)備,主要用于日常了解細胞的生長情況并觀察有無污染發(fā)生。如資金允許,,建議選用配置有照相系統(tǒng)的高品質(zhì)相差顯微鏡、解剖顯微鏡,、熒光顯微鏡,、錄像系統(tǒng)或縮時電影拍攝裝置等,可隨時拍攝并記錄細胞生長情況,。
超凈工作臺:目前絕大部分細胞實驗室使用超凈工作臺實現(xiàn)無菌操作,,具有操作簡單、安裝方便,、占用空間小且凈化效果很好,。超凈工作臺主要有兩種——側(cè)流式(垂直式)和外流式(水平層流式)。工作原理一般是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾,,由離心風機壓入靜壓箱,,再經(jīng)高效空氣過濾器精濾,,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區(qū),從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境,。
2,、(1)側(cè)流式工作臺:空氣凈化后的氣流由左或右側(cè)通過工作臺面流向?qū)?cè),也有從上向下或從下向上流向?qū)?cè),,形成氣流屏障保持工作區(qū)無菌,,工作臺結(jié)構(gòu)為封閉式;
(2)外流式工作臺:凈化后的空氣面向操作者流動,,因而外方氣流不致混入操作,,工作臺結(jié)構(gòu)為開放式,但進行有害物質(zhì)實驗操作對操作者不利,。超凈工作臺應需要定期請有關(guān)部門檢查潔凈度,,符合要求的超凈工作臺其潔凈度應達到100級,用塵埃粒子計數(shù)儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數(shù)量不應超過3.5個/L,;空氣流量應控制在0.75-1.0m3/s,;細菌菌落數(shù)平均<1個,根據(jù)無菌狀況必要時需要置換過濾器,。
3,、培養(yǎng)箱:體外培養(yǎng)的細胞和體內(nèi)細胞一樣,需要在恒定的溫度下生存,,一般適生長溫度為37℃,,溫差變化不應超過±0.5℃。溫度升高2℃時,,變不利于細胞生存,,溫度達到40℃以上細胞將很快死亡。因此,,可精確控溫的恒溫培養(yǎng)箱,、CO2培養(yǎng)箱是選擇。
(1)恒溫培養(yǎng)箱:應選隔水式或晶體管式自控溫培養(yǎng)箱,,此類培養(yǎng)箱靈敏度高,,溫度控制較穩(wěn)定。一般的恒溫培養(yǎng)箱價格較便宜,,其缺點是只宜于作密閉式培養(yǎng),。
(2)CO2培養(yǎng)箱:目前多數(shù)的細胞培養(yǎng)室已廣泛使用。CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點是能夠提供進行細胞培養(yǎng)時所需要的一定量的CO2(常用濃度為5%),,易于穩(wěn)定培養(yǎng)液pH,,適用于開放或半開放培養(yǎng)。使用培養(yǎng)瓶時,,為使培養(yǎng)瓶內(nèi)與外界保持通氣狀態(tài),,可將瓶蓋略微旋松,,為避免細胞被污染,使用這種培養(yǎng)方式時,,培養(yǎng)箱內(nèi)空氣必須保持清潔,,需定期用紫外線照射或酒精消毒,同時培養(yǎng)箱內(nèi)應放置盛有無菌蒸餾水的水槽,,防止培養(yǎng)液蒸發(fā),保持箱內(nèi)相對濕度在100%,。
(3)細胞培養(yǎng)耗材:培養(yǎng)細胞的器皿可用培養(yǎng)皿,、培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶,萊貝在本篇不做詳細介紹,,這部分知識會在實驗室耗材知識部分作重點介紹,。
4、細胞冷凍儲存器:儲存器常用的液氮容器,,根據(jù)使用需要分為不同類型和規(guī)格,。選擇液氮容器時需要考慮三個因素:容積大小、取放使用方便,、液氮揮發(fā)量,。液氮容器的大小一般在25-500L,可以儲存1ml的安瓿250-15000個左右,。液氮溫度低文帝可達-196℃,,使用時應注意避免凍傷。由于液氮易揮發(fā),,需注意觀察剩余液氮量,,及時補充,避免液氮不足使細胞受損或死亡,。目前有許多智能型細胞冷凍儲存器可供選擇,,可配置有電子控制器的液氮儲存器,實現(xiàn)凍存自動化,;并可監(jiān)測液氮水平和樣品溫度,,確保樣品溫度始終處于設(shè)定溫度點;可配置報警系統(tǒng),,設(shè)置液氮液面,、溫度、電池,、電壓,、電源等失常情況下報警;同時具備熱氣體旁路系統(tǒng),,防止高于-130℃的暖空氣進入液氮罐,,從而更有效地保護樣品,,防止容器內(nèi)升溫。另外,,可選擇液氮供應罐通過連接管給儲存罐補充液氮,,保證樣品安全。

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