熒光顯微鏡通常是利用一個高發(fā)光效率的點光源,，并經(jīng)過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光作為激發(fā)光,、激發(fā)標本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種顏色的熒光后,，然后再通過物鏡和目鏡進行放大，以便更好地進行觀察,。同時在強烈的對襯背景下,，即使熒光很微弱也很容易辨認，且敏感性較高,，主要可用于細胞結(jié)構(gòu)和功能及化學(xué)成分等的研究,。

熒光顯微鏡的基本構(gòu)造通常由普通光學(xué)顯微鏡再加一些如熒光光源、激發(fā)濾片,、雙色束分離器及阻斷濾片等附件的基礎(chǔ)上組成,。同時采用的熒光光源一般為超高壓汞燈，它可發(fā)出各種波長的光,，且每種熒光物質(zhì)都會有一個產(chǎn)生強熒光的激發(fā)光波長 ,，這時需加置激發(fā)濾片，通常有紫外,、紫色,、藍色及綠色激發(fā)濾片，僅需使一定波長的激發(fā)光透過并照射到標本上,，并將其他光都吸收掉,。同時在每種物質(zhì)被激發(fā)光照射后，更可在極短時間內(nèi)發(fā)射出比照射波長更長的可見熒光,。

需要注意的是,，熒光通常具有專一性，一般都較激發(fā)光弱,，且為了能觀察到更專一的熒光,，并在物鏡后面需加阻斷或壓制濾光片。其作用是：一是吸收或阻擋激發(fā)光進入目鏡,、以更好的避免干擾熒光或損傷到眼睛,，二是可選擇并使特異的熒光透過，更能表現(xiàn)出專一的熒光色彩,。同時注意,，兩種濾光片須選擇配合使用。
透射式熒光顯微鏡:
激發(fā)光源常會通過聚光鏡穿過標本材料來激發(fā)熒光,。常用的有暗視野集光器,，更可用普通集光器,，同時可調(diào)節(jié)反光鏡并使激發(fā)光轉(zhuǎn)射和旁射到標本上。其優(yōu)點為低倍鏡時熒光強,，而缺點就是隨放大倍數(shù)的增加而令熒光減弱,，所以對于觀察較大的標本材料來說是較好的。
落射式熒光顯微鏡：

落射式熒光顯微鏡是近代發(fā)展較快的新式熒光顯微鏡,，較為不同的是激發(fā)光從物鏡向下落射標本表面,，并可用同一物鏡作為照明聚光器和收集熒光的物鏡。同時光路中需加上一個雙色束分離器,，一般他與光鈾呈45°角,，激發(fā)光被反射到物鏡中，并聚集到樣品上,，且樣品所產(chǎn)生的熒光及由物鏡透鏡表面,、蓋玻片表面反射的激發(fā)光會同時進入物鏡，反射回到雙色束分離器,，并使激發(fā)光和熒光分開,，且殘余的激發(fā)光會再被阻斷濾片吸收?？蓳Q用不同的激發(fā)濾片,、雙色束分離器及阻斷濾片的組合插塊，更可滿足不同熒光反應(yīng)產(chǎn)物的需要,。這種熒光顯微鏡的優(yōu)點就是視野照明較為均勻,，且成像清晰，通常放大倍數(shù)越大熒光會越強,。

北京熒光顯微鏡的原理和結(jié)構(gòu)類型

會員登錄

收藏該商鋪

提示