RNA病毒基因組提取試劑盒 NobleRyder R0903

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RNA/DNA病毒基因組提取試劑盒

原理簡介
本試劑盒適合于從血清,、細胞上清,、淋巴液中提取RNA病毒基因組,，也可用于DNA病毒基因組的提取,。本試劑盒利用蛋白酶K破開病毒外殼,，放出RNA/DNA,，用玻璃奶吸附達到純化目的。
使用本試劑盒提取的RNA/DNA可用于各種常規(guī)操作,，包括RT-PCR、文庫構建,、Southern雜交等實驗,。

注意事項
1．一般病毒含量過低，zui后提取的基因組RNA/DNA電泳無法檢測到,，但RT-PCR/PCR等其他實驗還會有結果,。
2．同一樣本，如果想大量提取,，可以增加樣本量,，并且每一步試劑加量,，但使用次數(shù)會成倍減少。
3． 所有離心步驟用低溫離心機在4℃條件下離心,，如果實驗室沒有低溫離心機,，也可以使用常溫離心機，但所提得的RNA可能會降解嚴重些,。

操作步驟
準備工作：使用前請先開啟一瓶新的無水乙醇,，倒入漂洗液中，倒?jié)M至離瓶口約0.5-1ml,，蓋上瓶口,，搖勻。
1,、 取病毒上清液0.5ml,，12000rpm離心5min，盡量取上清使用,，棄去沉淀,。
2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K,，充分混勻,，65℃消化10-20min，期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,。
3,、 向管中加入500ul結合液，充分混勻,。
4．玻璃奶搖勻,。加入25ul搖勻的玻璃奶，混勻,，室溫放置2分鐘,，10000轉/分鐘離心1分鐘，去上清,；沉淀加入800ul漂洗液,，振蕩混勻，10000轉/分鐘離心1分鐘,，去上清,，再用600ul漂洗液洗一次。去上清,，再次離心2分鐘,，用小吸頭吸去上清。
7．室溫放置10分鐘,，加入30－50ul洗脫緩沖液混勻溶解,，靜置5分鐘,。離心，取上清為所提RNA,。
 

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