酵母蛋白小量提取試劑盒 NobleRyder P1140

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酵母蛋白小量提取試劑盒

一，試劑盒組份

二,，說明

酵母蛋白小量提取試劑盒用于從酵母細(xì)胞中分提取可溶性各種蛋白,。提取的蛋白可用于各種常規(guī)實驗,。如PAGE，Western,，免疫沉淀（immunol precipitation,，IP）和免疫共沉淀（co-IP）。酵母裂解液中不含任何去污劑,，可用各種方法測定蛋白含量,。

三，操作步驟

1.   酵母常規(guī)培養(yǎng),。

2.   離心收集酵母,。大概50－100ul的積壓體積。*棄上清,。

3.   加入酵母裂解液,，吹打重重懸。再次離心,，棄上清（此步的目的是將酵母洗一下,，也可以省掉此步）,。

4.   在酵母菌中，再加入0.5ml裂解液,，加入5ul PMSF,，5ulβ-巰基乙醇（在通風(fēng)處操作）。加入50mg左右的玻璃珠,，預(yù)冷,，渦流10min（每渦流1min，可以冰上冷卻1min）,。

5.   離心,，取上清。進行下一步實驗或者-70℃儲存,。

四,，注意事項

1，不同的酵母可能須渦流時間不同,，可根據(jù)實際情況延長或者縮短時間,。（比如蛋白濃度高低，蛋白降解情況等,。）

2,，如果一個月內(nèi)能夠用完，可將β-巰基乙醇按照百分之一的量一次性全部加入酵母裂解液中,。2－8度保存,。

3,，因為是采用物理方法破解酵母壁,，所以對于酶等一些易失活蛋白可能并不適合。

4,，為了你的實驗安全,，請戴手套操作。并注意通風(fēng),。

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 酵母蛋白小量提取試劑盒 NobleRyder P1140