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小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒
【簡單介紹】
上海士鋒生物專業(yè)經(jīng)營合成訂制,、培養(yǎng)基,、生化試劑、進(jìn)口ELISA試劑盒,、化工產(chǎn)品,、原料藥、實(shí)驗(yàn)室消耗品,、實(shí)驗(yàn)室耗材以及實(shí)驗(yàn)室器材,。產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué),、細(xì)菌學(xué),、遺傳學(xué)、免疫學(xué),、生物化學(xué),、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞治療等領(lǐng)域,。
【詳細(xì)說明】
小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒 全國各地現(xiàn)貨供應(yīng)
英文名稱:Mouse granzymes A,Gzms-A ELISA Kit
供 應(yīng) 商:IBL,,DRG ,R&D,,HCB
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小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒 樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心,。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)該再次離心,。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,,其余冷凍備用,。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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樣本收集與前期準(zhǔn)備:
利用ELISA進(jìn)行臨床檢驗(yàn)常見的樣本一般包括血液(指血,,靜脈血),,尿,糞便,,腦脊液,,胸腹水,前列腺液,,精液,,陰道分泌物等,這些樣本收集的時(shí)間,、方法和保存都有一定的要求,。
(一) 臨床樣本的收集
A、血液樣本
有些生理因素,,如吸煙,、進(jìn)食,、運(yùn)動(dòng),、情緒波動(dòng),、妊娠,、體位等均可影響血液中某些成分的變化,,有些甚至還有晝夜變化,。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件*為宜,,如無法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素,。
1.外周血
一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,,該部位應(yīng)無凍瘡,,炎癥,水腫,,破損,。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替,。對(duì)燒傷病人,,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(如白細(xì)胞計(jì)數(shù),、分類等)受生理因素影響波動(dòng)過大,,比較時(shí)宜使條件盡量*。涉及到體內(nèi)出,、凝血功能的檢測項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù),,出血時(shí)間或凝血時(shí)間等)的檢測,一定要注意了解患者是否用過抗凝,、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響,。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外,,目前絕大多數(shù)檢測項(xiàng)目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項(xiàng)目中,,有些(如血糖,,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,,一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜,;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),,0~4℃貯存活性減弱也不一,,這些項(xiàng)目的檢測必須及時(shí)而快速,;有些(如肌酸激酶等)受運(yùn)動(dòng)等因素影響較大。抽血時(shí)避免溶血的發(fā)生也十分重要,,尤其涉及血鉀,LDH等的測定,。
B、尿液樣本
同血標(biāo)本一樣,,尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動(dòng),、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本,,較濃縮和酸化,,有形成分(如血細(xì)胞,上皮細(xì)胞,,管形)相對(duì)集中便于觀察,。隨機(jī)尿即隨意一次尿,留取方便,,但受飲食,、運(yùn)動(dòng)、藥物影響較甚,,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果,,如飲食性蛋白尿,,飲食性糖尿,,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖,,尿蛋白和尿膽原的檢查,,此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性,檢出較輕微的病變,。12小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù)即Addis計(jì)數(shù)(前晚8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液),,因時(shí)間較長,,細(xì)菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛,。24小時(shí)尿(*天晨8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,,包括蛋白,糖,,尿17-酮,、17-羥類固醇,兒茶酚胺,,Ca2+等,,檢測不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐,。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng),,要求無菌,沖洗外陰后留取標(biāo)本,。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量,,zui少12 ml,50 ml,,定時(shí)尿須全部收集,,對(duì)女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本,。
C,、糞便樣本
糞便標(biāo)本的檢測對(duì)判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價(jià)值。采集時(shí)要求用干凈的竹簽選取含有粘液,、膿血等異常病變成分的糞便,,對(duì)外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材,。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計(jì)數(shù)應(yīng)收集24小時(shí)糞便,。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,,保溫送檢,。查日本血吸蟲蟲卵時(shí)應(yīng)取粘液、膿血部分,,孵化毛蚴時(shí)至少留取30g糞便,,且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時(shí)或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢,。隱血試驗(yàn)(化學(xué)法),,試驗(yàn)前3日禁食肉類及含動(dòng)物血食物并禁服鐵劑,維生素C等。所有糞便標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)應(yīng)檢查完畢,,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,來不及檢測的,應(yīng)及時(shí)用PBS進(jìn)行緩沖處理,,離心去上清保存。
D,、腦脊液樣本
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,,放置過久將影響檢驗(yàn)結(jié)果:如細(xì)胞變性,破壞,,導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類不準(zhǔn),;有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少;細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率,。腦脊液抽取后一般分裝三個(gè)無菌管,,*管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,,三管的順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難,,全部送檢和檢測過程應(yīng)注意安全,。
E、胸腹水樣本
與腦脊液標(biāo)本一樣,,采集后的標(biāo)本注意安全,,及時(shí)送檢。一般也分裝三管,,一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查,,一管生化檢查,一管細(xì)菌培養(yǎng),,順序以與腦脊液相同為宜,。
F、前列腺液樣本
前列腺液標(biāo)本由前列腺按摩后采集,,液量少時(shí)直接滴在載玻片上及時(shí)送檢,,須注意防止標(biāo)本蒸干,量多時(shí)收集在潔凈干燥的試管中,。若按摩不出前列腺液,,可檢查按摩后的尿液沉渣。
G,、精液樣本
精液標(biāo)本采集前應(yīng)禁欲3~7天,,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,保溫并及時(shí)送檢。由于精子生成日間變動(dòng)較大,,一般應(yīng)檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷,。
H、陰道分泌物樣本
陰道標(biāo)本采集前24小時(shí)應(yīng)禁止房事,、盆浴,、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等,,取材所用器械需清潔,。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材,,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標(biāo)本,,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標(biāo)本。
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樣本收集與前期準(zhǔn)備:
利用ELISA進(jìn)行臨床檢驗(yàn)常見的樣本一般包括血液(指血,,靜脈血),,尿,糞便,,腦脊液,,胸腹水,前列腺液,,精液,,陰道分泌物等,這些樣本收集的時(shí)間,、方法和保存都有一定的要求,。
(一) 臨床樣本的收集
A、血液樣本
有些生理因素,,如吸煙,、進(jìn)食,、運(yùn)動(dòng),、情緒波動(dòng),、妊娠,、體位等均可影響血液中某些成分的變化,,有些甚至還有晝夜變化,。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件*為宜,,如無法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素,。
1.外周血
一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,,該部位應(yīng)無凍瘡,,炎癥,水腫,,破損,。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替,。對(duì)燒傷病人,,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(如白細(xì)胞計(jì)數(shù),、分類等)受生理因素影響波動(dòng)過大,,比較時(shí)宜使條件盡量*。涉及到體內(nèi)出,、凝血功能的檢測項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù),,出血時(shí)間或凝血時(shí)間等)的檢測,一定要注意了解患者是否用過抗凝,、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響,。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外,,目前絕大多數(shù)檢測項(xiàng)目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項(xiàng)目中,,有些(如血糖,,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,,一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜,;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),,0~4℃貯存活性減弱也不一,,這些項(xiàng)目的檢測必須及時(shí)而快速,;有些(如肌酸激酶等)受運(yùn)動(dòng)等因素影響較大。抽血時(shí)避免溶血的發(fā)生也十分重要,,尤其涉及血鉀,LDH等的測定,。
B、尿液樣本
同血標(biāo)本一樣,,尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動(dòng),、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本,,較濃縮和酸化,,有形成分(如血細(xì)胞,上皮細(xì)胞,,管形)相對(duì)集中便于觀察,。隨機(jī)尿即隨意一次尿,留取方便,,但受飲食,、運(yùn)動(dòng)、藥物影響較甚,,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果,,如飲食性蛋白尿,,飲食性糖尿,,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖,,尿蛋白和尿膽原的檢查,,此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性,檢出較輕微的病變,。12小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù)即Addis計(jì)數(shù)(前晚8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液),,因時(shí)間較長,,細(xì)菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛,。24小時(shí)尿(*天晨8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,,包括蛋白,糖,,尿17-酮,、17-羥類固醇,兒茶酚胺,,Ca2+等,,檢測不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐,。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng),,要求無菌,沖洗外陰后留取標(biāo)本,。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量,,zui少12 ml,50 ml,,定時(shí)尿須全部收集,,對(duì)女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本,。
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D,、腦脊液樣本
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,,放置過久將影響檢驗(yàn)結(jié)果:如細(xì)胞變性,破壞,,導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類不準(zhǔn),;有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少;細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率,。腦脊液抽取后一般分裝三個(gè)無菌管,,*管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,,三管的順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難,,全部送檢和檢測過程應(yīng)注意安全,。
E、胸腹水樣本
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G,、精液樣本
精液標(biāo)本采集前應(yīng)禁欲3~7天,,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,保溫并及時(shí)送檢。由于精子生成日間變動(dòng)較大,,一般應(yīng)檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷,。
H、陰道分泌物樣本
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