產(chǎn)品展示
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒
【簡(jiǎn)單介紹】
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【詳細(xì)說(shuō)明】
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 全國(guó)各地現(xiàn)貨供應(yīng)
英文名稱:Mouse Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit
供 應(yīng) 商:IBL,,DRG ,,R&D,HCB
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小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒 樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心,。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心,。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,,保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實(shí)行,。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
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樣本收集與前期準(zhǔn)備:
利用ELISA進(jìn)行臨床檢驗(yàn)常見(jiàn)的樣本一般包括血液(指血,,靜脈血),尿,,糞便,,腦脊液,胸腹水,,前列腺液,,精液,陰道分泌物等,,這些樣本收集的時(shí)間,、方法和保存都有一定的要求。
(一) 臨床樣本的收集
A,、血液樣本
有些生理因素,,如吸煙、進(jìn)食,、運(yùn)動(dòng),、情緒波動(dòng)、妊娠,、體位等均可影響血液中某些成分的變化,,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,,以條件*為宜,,如無(wú)法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素,。
1.外周血
一般選取左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)采血,,該部位應(yīng)無(wú)凍瘡,炎癥,,水腫,,破損。如該部位不符合要求,,以其他手指部位代替,。對(duì)燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(cè)(如白細(xì)胞計(jì)數(shù),、分類等)受生理因素影響波動(dòng)過(guò)大,,比較時(shí)宜使條件盡量*。涉及到體內(nèi)出,、凝血功能的檢測(cè)項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù),,出血時(shí)間或凝血時(shí)間等)的檢測(cè),一定要注意了解患者是否用過(guò)抗凝,、促凝藥物,,以便在減少或避免干擾因素的影響。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測(cè)等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外,,目前絕大多數(shù)檢測(cè)項(xiàng)目的分析檢測(cè)可直接采用靜脈血的血清,。在血清檢測(cè)項(xiàng)目中,有些(如血糖,,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,,一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜;有些在血中衰變較快(血清酶活性測(cè)定如ACP活性等),,0~4℃貯存活性減弱也不一,,這些項(xiàng)目的檢測(cè)必須及時(shí)而快速;有些(如肌酸激酶等)受運(yùn)動(dòng)等因素影響較大,。抽血時(shí)避免溶血的發(fā)生也十分重要,,尤其涉及血鉀,LDH等的測(cè)定,。
B,、尿液樣本
同血標(biāo)本一樣,尿液標(biāo)本受飲食,、運(yùn)動(dòng),、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,,故一般來(lái)說(shuō)晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿,。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本,較濃縮和酸化,,有形成分(如血細(xì)胞,,上皮細(xì)胞,管形)相對(duì)集中便于觀察,。隨機(jī)尿即隨意一次尿,,留取方便,但受飲食,、運(yùn)動(dòng),、藥物影響較甚,,易于出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,,飲食性糖尿,,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖,,尿蛋白和尿膽原的檢查,,此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性,檢出較輕微的病變,。12小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù)即Addis計(jì)數(shù)(前晚8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液),,因時(shí)間較長(zhǎng),細(xì)菌易繁殖,,須加入防腐劑甲醛。24小時(shí)尿(*天晨8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,,包括蛋白,,糖,尿17-酮,、17-羥類固醇,,兒茶酚胺,Ca2+等,,檢測(cè)不同的物質(zhì),,選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng),,要求無(wú)菌,,沖洗外陰后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量,,zui少12 ml,,50 ml,定時(shí)尿須全部收集,,對(duì)女性患者應(yīng)避免陰道分泌物,、經(jīng)血污染尿標(biāo)本。
C,、糞便樣本
糞便標(biāo)本的檢測(cè)對(duì)判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價(jià)值,。采集時(shí)要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,,對(duì)外觀無(wú)異常的糞便須從表面,、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計(jì)數(shù)應(yīng)收集24小時(shí)糞便,。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查,,從有膿血和稀軟處取材,,保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時(shí)應(yīng)取粘液,、膿血部分,,孵化毛蚴時(shí)至少留取30g糞便,且需盡快處理,。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時(shí)或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢,。隱血試驗(yàn)(化學(xué)法),試驗(yàn)前3日禁食肉類及含動(dòng)物血食物并禁服鐵劑,,維生素C等,。所有糞便標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)應(yīng)檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,來(lái)不及檢測(cè)的,,應(yīng)及時(shí)用PBS進(jìn)行緩沖處理,,離心去上清保存。
D,、腦脊液樣本
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,,放置過(guò)久將影響檢驗(yàn)結(jié)果:如細(xì)胞變性,破壞,,導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類不準(zhǔn),;有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少;細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率,。腦脊液抽取后一般分裝三個(gè)無(wú)菌管,,*管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,,三管的順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難,,全部送檢和檢測(cè)過(guò)程應(yīng)注意安全,。
E、胸腹水樣本
與腦脊液標(biāo)本一樣,,采集后的標(biāo)本注意安全,,及時(shí)送檢。一般也分裝三管,,一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查,,一管生化檢查,一管細(xì)菌培養(yǎng),,順序以與腦脊液相同為宜,。
F、前列腺液樣本
前列腺液標(biāo)本由前列腺按摩后采集,,液量少時(shí)直接滴在載玻片上及時(shí)送檢,,須注意防止標(biāo)本蒸干,,量多時(shí)收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液,,可檢查按摩后的尿液沉渣,。
G、精液樣本
精液標(biāo)本采集前應(yīng)禁欲3~7天,,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,,保溫并及時(shí)送檢。由于精子生成日間變動(dòng)較大,,一般應(yīng)檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷,。
H、陰道分泌物樣本
陰道標(biāo)本采集前24小時(shí)應(yīng)禁止房事,、盆浴,、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等,,取材所用器械需清潔,。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材,,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標(biāo)本,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標(biāo)本,。
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樣本收集與前期準(zhǔn)備:
利用ELISA進(jìn)行臨床檢驗(yàn)常見(jiàn)的樣本一般包括血液(指血,,靜脈血),尿,,糞便,,腦脊液,胸腹水,,前列腺液,,精液,陰道分泌物等,,這些樣本收集的時(shí)間,、方法和保存都有一定的要求。
(一) 臨床樣本的收集
A,、血液樣本
有些生理因素,,如吸煙、進(jìn)食,、運(yùn)動(dòng),、情緒波動(dòng)、妊娠,、體位等均可影響血液中某些成分的變化,,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,,以條件*為宜,,如無(wú)法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素,。
1.外周血
一般選取左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)采血,,該部位應(yīng)無(wú)凍瘡,炎癥,,水腫,,破損。如該部位不符合要求,,以其他手指部位代替,。對(duì)燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(cè)(如白細(xì)胞計(jì)數(shù),、分類等)受生理因素影響波動(dòng)過(guò)大,,比較時(shí)宜使條件盡量*。涉及到體內(nèi)出,、凝血功能的檢測(cè)項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù),,出血時(shí)間或凝血時(shí)間等)的檢測(cè),一定要注意了解患者是否用過(guò)抗凝,、促凝藥物,,以便在減少或避免干擾因素的影響。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測(cè)等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外,,目前絕大多數(shù)檢測(cè)項(xiàng)目的分析檢測(cè)可直接采用靜脈血的血清,。在血清檢測(cè)項(xiàng)目中,有些(如血糖,,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,,一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜;有些在血中衰變較快(血清酶活性測(cè)定如ACP活性等),,0~4℃貯存活性減弱也不一,,這些項(xiàng)目的檢測(cè)必須及時(shí)而快速;有些(如肌酸激酶等)受運(yùn)動(dòng)等因素影響較大,。抽血時(shí)避免溶血的發(fā)生也十分重要,,尤其涉及血鉀,LDH等的測(cè)定,。
B,、尿液樣本
同血標(biāo)本一樣,尿液標(biāo)本受飲食,、運(yùn)動(dòng),、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,,故一般來(lái)說(shuō)晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿,。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本,較濃縮和酸化,,有形成分(如血細(xì)胞,,上皮細(xì)胞,管形)相對(duì)集中便于觀察,。隨機(jī)尿即隨意一次尿,,留取方便,但受飲食,、運(yùn)動(dòng),、藥物影響較甚,,易于出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,,飲食性糖尿,,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖,,尿蛋白和尿膽原的檢查,,此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性,檢出較輕微的病變,。12小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù)即Addis計(jì)數(shù)(前晚8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液),,因時(shí)間較長(zhǎng),細(xì)菌易繁殖,,須加入防腐劑甲醛。24小時(shí)尿(*天晨8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,,包括蛋白,,糖,尿17-酮,、17-羥類固醇,,兒茶酚胺,Ca2+等,,檢測(cè)不同的物質(zhì),,選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng),,要求無(wú)菌,,沖洗外陰后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量,,zui少12 ml,,50 ml,定時(shí)尿須全部收集,,對(duì)女性患者應(yīng)避免陰道分泌物,、經(jīng)血污染尿標(biāo)本。
C,、糞便樣本
糞便標(biāo)本的檢測(cè)對(duì)判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價(jià)值,。采集時(shí)要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,,對(duì)外觀無(wú)異常的糞便須從表面,、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計(jì)數(shù)應(yīng)收集24小時(shí)糞便,。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查,,從有膿血和稀軟處取材,,保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時(shí)應(yīng)取粘液,、膿血部分,,孵化毛蚴時(shí)至少留取30g糞便,且需盡快處理,。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時(shí)或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢,。隱血試驗(yàn)(化學(xué)法),試驗(yàn)前3日禁食肉類及含動(dòng)物血食物并禁服鐵劑,,維生素C等,。所有糞便標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)應(yīng)檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,來(lái)不及檢測(cè)的,,應(yīng)及時(shí)用PBS進(jìn)行緩沖處理,,離心去上清保存。
D,、腦脊液樣本
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,,放置過(guò)久將影響檢驗(yàn)結(jié)果:如細(xì)胞變性,破壞,,導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類不準(zhǔn),;有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少;細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率,。腦脊液抽取后一般分裝三個(gè)無(wú)菌管,,*管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,,三管的順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難,,全部送檢和檢測(cè)過(guò)程應(yīng)注意安全,。
E、胸腹水樣本
與腦脊液標(biāo)本一樣,,采集后的標(biāo)本注意安全,,及時(shí)送檢。一般也分裝三管,,一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查,,一管生化檢查,一管細(xì)菌培養(yǎng),,順序以與腦脊液相同為宜,。
F、前列腺液樣本
前列腺液標(biāo)本由前列腺按摩后采集,,液量少時(shí)直接滴在載玻片上及時(shí)送檢,,須注意防止標(biāo)本蒸干,,量多時(shí)收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液,,可檢查按摩后的尿液沉渣,。
G、精液樣本
精液標(biāo)本采集前應(yīng)禁欲3~7天,,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,,保溫并及時(shí)送檢。由于精子生成日間變動(dòng)較大,,一般應(yīng)檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷,。
H、陰道分泌物樣本
陰道標(biāo)本采集前24小時(shí)應(yīng)禁止房事,、盆浴,、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等,,取材所用器械需清潔,。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材,,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標(biāo)本,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標(biāo)本,。
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