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小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒
【簡單介紹】
上海士鋒生物專業(yè)經(jīng)營合成訂制、培養(yǎng)基,、生化試劑、進口ELISA試劑盒,、化工產(chǎn)品、原料藥,、實驗室消耗品,、實驗室耗材以及實驗室器材。產(chǎn)品涉及分子生物學,、細胞生物學、細菌學,、遺傳學、免疫學,、生物化學、蛋白質(zhì)學,、細胞治療等領域,。
【詳細說明】
小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒 全國各地現(xiàn)貨供應
英文名稱:Mouse Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA KIT
供 應 商:IBL,DRG ,,R&D,HCB
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小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒 樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心,。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心,。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,,其余冷凍備用,。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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樣本收集與前期準備:
利用ELISA進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),,尿,糞便,,腦脊液,胸腹水,,前列腺液,精液,,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間,、方法和保存都有一定的要求。
(一) 臨床樣本的收集
A,、血液樣本
有些生理因素,如吸煙,、進食,、運動,、情緒波動,、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標本的采集應盡量避免生理因素干擾,,以條件*為宜,如無法避免,,應在標本上注明該因素,。
1.外周血
一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,,該部位應無凍瘡,炎癥,,水腫,破損,。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替,。對燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血,。由于部分血液常規(guī)檢測(如白細胞計數(shù)、分類等)受生理因素影響波動過大,,比較時宜使條件盡量*,。涉及到體內(nèi)出,、凝血功能的檢測項目(如血小板計數(shù),出血時間或凝血時間等)的檢測,,一定要注意了解患者是否用過抗凝、促凝藥物,,以便在減少或避免干擾因素的影響,。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數(shù)檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清,。在血清檢測項目中,,有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,,一般以清晨空腹血標本為宜;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),,0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項目的檢測必須及時而快速;有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大,。抽血時避免溶血的發(fā)生也十分重要,,尤其涉及血鉀,,LDH等的測定。
B,、尿液樣本
同血標本一樣,尿液標本受飲食,、運動,、藥物量等因素的影響也較大,,特別是飲食的影響,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿,。晨尿是指清晨起床后的*次尿標本,較濃縮和酸化,,有形成分(如血細胞,,上皮細胞,,管形)相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿,,留取方便,但受飲食,、運動,、藥物影響較甚,,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果,,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,,維生素C干擾潛血結(jié)果等,。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時的尿標本可增加試驗敏感性,,檢出較輕微的病變。12小時尿細胞計數(shù)即Addis計數(shù)(前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液),,因時間較長,細菌易繁殖,,須加入防腐劑甲醛。24小時尿(*天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學物質(zhì)的定量,,包括蛋白,,糖,,尿17-酮、17-羥類固醇,,兒茶酚胺,Ca2+等,,檢測不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐,。清潔中段尿多用于尿細菌培養(yǎng),要求無菌,,沖洗外陰后留取標本。所有尿標本的收集都應足量,,zui少12 ml,50 ml,,定時尿須全部收集,,對女性患者應避免陰道分泌物,、經(jīng)血污染尿標本,。
C、糞便樣本
糞便標本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價值,。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,,對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材,。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數(shù)應收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應于排便后立即檢查,,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢,。查日本血吸蟲蟲卵時應取粘液、膿血部分,,孵化毛蚴時至少留取30g糞便,且需盡快處理,。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢,。隱血試驗(化學法),,試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑,,維生素C等。所有糞便標本采集后1小時內(nèi)應檢查完畢,,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,來不及檢測的,應及時用PBS進行緩沖處理,,離心去上清保存。
D,、腦脊液樣本
腦脊液標本采集后立即送檢,,放置過久將影響檢驗結(jié)果:如細胞變性,破壞,,導致計數(shù)和分類不準;有些化學物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少,;細菌發(fā)生自溶影響細菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管,,*管作細菌培養(yǎng),第二管作化學分析和免疫學檢查,,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管的順序不宜顛倒,。因標本采集較難,全部送檢和檢測過程應注意安全,。
E,、胸腹水樣本
與腦脊液標本一樣,,采集后的標本注意安全,,及時送檢。一般也分裝三管,,一管作常規(guī)細胞學檢查,一管生化檢查,,一管細菌培養(yǎng),順序以與腦脊液相同為宜,。
F,、前列腺液樣本
前列腺液標本由前列腺按摩后采集,,液量少時直接滴在載玻片上及時送檢,須注意防止標本蒸干,量多時收集在潔凈干燥的試管中,。若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液沉渣,。
G,、精液樣本
精液標本采集前應禁欲3~7天,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,,保溫并及時送檢。由于精子生成日間變動較大,,一般應檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷。
H,、陰道分泌物樣本
陰道標本采集前24小時應禁止房事、盆浴,、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等,,取材所用器械需清潔。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部,、宮頸管口等處取材,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標本,,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標本。
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A,、血液樣本
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1.外周血
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2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數(shù)檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清,。在血清檢測項目中,,有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,,一般以清晨空腹血標本為宜;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),,0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項目的檢測必須及時而快速;有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大,。抽血時避免溶血的發(fā)生也十分重要,,尤其涉及血鉀,,LDH等的測定。
B,、尿液樣本
同血標本一樣,尿液標本受飲食,、運動,、藥物量等因素的影響也較大,,特別是飲食的影響,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿,。晨尿是指清晨起床后的*次尿標本,較濃縮和酸化,,有形成分(如血細胞,,上皮細胞,,管形)相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿,,留取方便,但受飲食,、運動,、藥物影響較甚,,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果,,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,,維生素C干擾潛血結(jié)果等,。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時的尿標本可增加試驗敏感性,,檢出較輕微的病變。12小時尿細胞計數(shù)即Addis計數(shù)(前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液),,因時間較長,細菌易繁殖,,須加入防腐劑甲醛。24小時尿(*天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學物質(zhì)的定量,,包括蛋白,,糖,,尿17-酮、17-羥類固醇,,兒茶酚胺,Ca2+等,,檢測不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐,。清潔中段尿多用于尿細菌培養(yǎng),要求無菌,,沖洗外陰后留取標本。所有尿標本的收集都應足量,,zui少12 ml,50 ml,,定時尿須全部收集,,對女性患者應避免陰道分泌物,、經(jīng)血污染尿標本,。
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D,、腦脊液樣本
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G,、精液樣本
精液標本采集前應禁欲3~7天,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,,保溫并及時送檢。由于精子生成日間變動較大,,一般應檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷。
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