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哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物病理剖檢方法
點(diǎn)擊次數(shù):952 發(fā)布時(shí)間:2017-11-6
一、基本要求
(一)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背景資料記錄
(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源,、種類,、年齡、性別,、原編號(hào),、體重、臨床癥狀等,。
(2)剖檢時(shí)間,、地點(diǎn),麻醉方法,、時(shí)間,、麻醉者,處死方法,、解剖者,、記錄人、溫度,、濕度,。
(3)其他指標(biāo):動(dòng)物剖殺前禁食(不禁水)時(shí)間一致,為12h,。
(二)體表檢查
一般用于組織學(xué)取材的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物剖殺前應(yīng)先隔離檢疫7~10d,,用于實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組動(dòng)物的病理剖檢視不同動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的要求而定。剖檢前的體表檢查項(xiàng)目如下:
1,、發(fā)育狀態(tài)
體格發(fā)育是否與年齡,、品種相稱,各部發(fā)育比例是否正常,,有無(wú)畸形,。
2、營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)
豐滿還是消瘦,,檢查時(shí)可用手撫摸實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背,、腰部,,營(yíng)養(yǎng)良好時(shí),背腰部厚實(shí),,皮膚彈性好,。營(yíng)養(yǎng)不良時(shí),背腰部椎骨突出,,肋骨明顯,。
3、精神狀態(tài)
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的自主活動(dòng),、運(yùn)動(dòng)情況,,對(duì)外界的反應(yīng)(遲鈍或亢進(jìn))、步態(tài)如何,。
4,、感覺(jué)器官
眼睛的瞳孔是否清晰等,有無(wú)分泌物,,眼瞼有無(wú)發(fā)炎及紅腫,,球結(jié)膜顏色變化,有否潮紅,、蒼白,、黃染或發(fā)紺。
5,、呼吸系統(tǒng)
呼吸動(dòng)物如呼吸次數(shù)、節(jié)律,、有無(wú)呼吸困難,;上呼吸道檢查如鼻腔分泌物多少、有無(wú)噴嚏和咳嗽,;必要時(shí)可通過(guò)聽(tīng)診檢查肺部,。
6、消化系統(tǒng)
采食與飲水觀察,,包括食欲廢絕,、減退、亢進(jìn)和異嗜,,口腔黏膜顏色和氣味,。有無(wú)嘔吐、腹瀉,、便秘,,肛周有無(wú)污物,糞便數(shù)量,、硬度,、顏色,、氣味等。
7,、被毛和皮膚
檢查皮膚顏色,、溫度、彈性,、有無(wú)創(chuàng)傷,、膿瘍、疥癬,、濕疹,,毛發(fā)色澤、疏密,、有無(wú)脫落,。
(三)病理取材基本要求
(1) 病理檢查應(yīng)分層次進(jìn)行,先進(jìn)行一般外觀觀察,,然后剖檢觀察,,再進(jìn)行光鏡詳細(xì)檢查。
(2) 通常選擇正常與病變交界處組織,,即包括病變本身及病變周圍組織,。
(3) 對(duì)照組動(dòng)物相同器官取材時(shí),選材部位應(yīng)盡量一致,。
(4) 肉眼看不到的明顯病變時(shí),,各試驗(yàn)組選取標(biāo)本位置應(yīng)一致。
(5) 所選組織應(yīng)包括臟器全部層次結(jié)構(gòu)或重要結(jié)構(gòu),,如腎應(yīng)包括皮質(zhì),、髓質(zhì)和腎盂。
(6) 體積大和分葉的器官,,應(yīng)視不同組織選取多個(gè)部位,,小器官可整體取材并固定,如淋巴結(jié),、扁桃體,、甲狀腺等。
(7) 胃腸標(biāo)本應(yīng)將內(nèi)容物沖洗掉,,以免內(nèi)容物影響組織固定,,產(chǎn)生自溶。
(8) 所取材料應(yīng)盡量保持肉眼標(biāo)本的完整性,,不宜過(guò)厚或過(guò)薄,,一般厚約3~5mm,大小為1.5~2cm2。
(9) 切取組織時(shí)不要擠壓,,使用鋒利刀具,,少用剪刀,勿選用被器械鉗壓過(guò)的部位,。
(10)標(biāo)本取材要熟悉,,盡可能快的完成整個(gè)過(guò)程,特別是易自溶的組織,,如腸道,、腦、腺體等,。
(11)剖檢記錄應(yīng)客觀,、詳細(xì),用形象描述而不能用診斷的病名來(lái)代替,。
(12)同一實(shí)驗(yàn)中的對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物應(yīng)交叉剖檢,,嚴(yán)格統(tǒng)一各種條件和操作,盡量避免各種可能的干擾因素,。
二,、病理剖檢基本操作
(一)常用器械及使用方法
1、解剖刀
主要用于切開(kāi)和分割軟組織,,刀片宜用血管鉗(可持針鉗)夾持安裝,,避免割傷手指。
常用的持刀法有以下4種:執(zhí)弓式,、抓持式,、執(zhí)筆式、反挑式,。
2,、手術(shù)剪
用于分離與剪開(kāi)
3、血管鉗
用于分離和鉗夾組織,,鉗夾縫合針和布巾等。
4,、手術(shù)鑷
用于夾持組織,,以利于解剖和縫合。
5,、拉鉤
用于牽引和暴露
(二)基本操作
1,、切開(kāi)
在同一平面上時(shí),先繃緊組織,,將刀刃與平面垂直,,用力要得當(dāng),一次垂直切開(kāi),切口整齊而不偏斜,,禁止斜切和鋸切,,以減少損傷。切開(kāi)多層組織時(shí),,一般應(yīng)按組織層次分層切開(kāi),,避免損傷深層組織器官。
2,、組織分離法
可用銳性分離法,,使用刀、剪等銳性器械直接切割,,如皮膚,、黏膜、精細(xì)結(jié)構(gòu)和緊密連結(jié)組織的分離,;也可用鈍性分離法,,使用分柄、止血鉗,、剝離器,,手指等分離,如肌肉,,疏松結(jié)締組織等的分離,。
3、結(jié)扎
用絲線打結(jié)的方法扎組織和血管,,參與縫合器官和皮膚,。
4、止血
大量出血導(dǎo)致胸,、腹部積血使剖檢視野模糊不清,,可能會(huì)影響和干擾病變的辨別和取材,因此動(dòng)物剖檢有時(shí)要求止血,。
(1) 紗布?jí)K壓迫止血法,。剖檢過(guò)程中,為觀察病變性質(zhì)和部位,,辨清組織和神,、血管通路,以及對(duì)較廣泛的毛細(xì)血管滲出,,可用紗布按壓施行短暫性的止血,,但不可用紗布來(lái)回擦拭血液,以免損傷組織,。
(2) 鉗夾止血法,。先用紗布?jí)K止血,看清出血點(diǎn)或血管后用止血鉗的垂直對(duì)準(zhǔn)出血點(diǎn),迅速而準(zhǔn)確的鉗夾并捻轉(zhuǎn),,使血管閉塞而止血,。
(3) 結(jié)扎止血法。用于動(dòng)脈出血或較大的血管出血,。
三,、剖檢取材程序
(一)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體的固定,通常為仰臥位固定,。
(二)剖檢順序多為先腹腔后胸腔,,再腦、脊髓,、骨髓,、皮膚肌肉等。取材順序基本與此相同,。
(三) 檢查內(nèi)容
1,、位置
有無(wú)移位、異位
2,、大小
體積增大,、縮小或腫大
3、色澤
整體或局部顏色的增減改變,。
4,、附加物
有無(wú)出血、積液,、粘連,。
5、質(zhì)地
硬,、韌,、軟等。
6,、切面
多汁,、泡沫狀、帶血,、膿汁,、干燥等。
7 ,、中空器官的黏膜面
有無(wú)出血、潰瘍,、增厚,、隆起物等。
(四)剖檢和取材程度
1、腹腔和腹腔器官
沿腹部正中線切開(kāi)劍突至肛門(mén)之間的腹前壁,,再沿zui低位肋骨分別向左右兩側(cè)切開(kāi)側(cè)腹壁至脊柱兩旁,,*暴露腹腔器官。觀察有無(wú)積液,、血液和炎性滲出物,,如有則用吸管吸出,測(cè)量容積并經(jīng)離心沉淀涂片檢查,,必要時(shí)作細(xì)菌培養(yǎng),。檢查粘膜是否光滑,有無(wú)充血,、瘀血,、出血、破裂,、膿腫,、粘連、腫瘤,、寄生蟲(chóng)等,,膈的緊張度及有無(wú)破裂。
(1)脾臟,。檢查大小,、厚薄、硬度,、性狀,、色澤、有否肥厚,、破裂等,。然后沿長(zhǎng)軸將脾切成兩半,切面要平整,,檢查脾小梁,、紅髓、濾泡的色澤,,切面的出血量,。
(2) 胰腺。檢查胰腺色澤和硬度,,切面檢查有無(wú)出血,。
(3)胃腸。檢查胃的大小,、胃腸道漿膜面的色澤,,有無(wú)粘連,、腫瘤、寄生蟲(chóng)結(jié)節(jié),。然后沿胃大彎,、腸系膜附著部依次剪開(kāi)胃、十二指腸,、空腸,、回腸、盲腸,、結(jié)腸,、直腸。觀察胃內(nèi)有無(wú)異物,,內(nèi)容物的氣味及性狀,,除去內(nèi)容物,檢查黏膜顏色,,有無(wú)充血,、出血、化膿,。采用邊剪開(kāi)邊觀察的辦法檢查腸管,,觀察腸內(nèi)容物數(shù)量、性狀,,有無(wú)氣體,、血液、異物,、寄生蟲(chóng),,腸黏膜皺壁有無(wú)增厚、水腫,、充血,、粘液量、潰瘍,、壞死,、淋巴組織性狀及有無(wú)炎癥。
(4) 腎臟,。首先檢查腎臟大小,、硬度、被膜是否容易剝離,,腎表面的色澤,、平滑度,有無(wú)疤痕,、出血變化,。然后檢查切面皮質(zhì)和髓質(zhì)的色澤,,有無(wú)瘀血、出血,、化膿和梗死。注意觀察皮質(zhì)和髓質(zhì)交界處的切面是否隆突,,以及腎盂,、輸尿管、腎淋巴結(jié)的性狀,,有無(wú)腫瘤及寄生蟲(chóng)等,。
(5) 肝臟。首先檢查肝臟的大小,、被膜的性狀,、邊緣的厚薄、實(shí)質(zhì)的硬度和色澤,,以及肝淋巴結(jié),、血管、肝管等的性狀,。然后作切面,,檢查切面的出血量、色澤,,肝小葉性狀,、有無(wú)膿腫、肝壞死等變化,。
(6) 腎上腺,。觀察外形、大小,、色澤和硬度,,作縱切和橫切,檢查皮質(zhì)和髓質(zhì)的色澤及有無(wú)出血,。
2,、盆腔器官
(1) 膀胱。檢查膀胱的大小,、尿量及色澤,,黏膜有無(wú)出血、炎癥和結(jié)石等,。
(2) 雄性生殖器官,。檢查睪丸、附睪,、凝固腺,、前列腺有無(wú)粘連,、出血、水腫,、積液等,。
(3) 雌性生殖器官。沿子宮體背側(cè)剪開(kāi)子宮角,,檢查子宮內(nèi)膜的色澤,、有無(wú)充血、出血,、炎癥等,,觀察卵巢和輸卵管有無(wú)粘連、出血,、水腫,、積液等。
3,、胸腔,、口腔及其器官
用鑷子夾住胸骨劍突,剪斷膈肌與胸骨的連結(jié),,提起胸骨,,在胸椎兩側(cè)分別剪斷左、右側(cè)胸壁的肋骨,,取下整個(gè)胸壁,,打開(kāi)胸腔,依次取出胸腺和心臟,。將下頜骨的兩下頜支內(nèi)側(cè)與舌連結(jié)的肌肉切斷,,將咽、喉,、氣管,、食道與周圍組織分離,用鑷子夾住氣管向上提起,,剪斷肺與胸膜的連結(jié)韌帶,,然后將咽、喉,、氣管,、食道連同整個(gè)肺臟一并取出。如有積液應(yīng)觀察其數(shù)量和性狀,,盡量吸取,,測(cè)量容積并涂片,檢查胸膜色澤,,有無(wú)出血,、充血或粘連,。
(1) 心臟。剪開(kāi)心包膜,,暴露心臟,,注意心包的光澤度及心包內(nèi)液體的情況,心臟的大小,、外形,、心外膜情況。自下腔靜脈入口處至右心房作直線剖開(kāi),,從此直線中點(diǎn)沿心臟右緣剖至心尖部,從距離心尖部與心室間隔右側(cè)1cm處平行地剖至肺動(dòng)脈,;檢查右心房,、右心室、三尖瓣,、肺動(dòng)脈瓣,、腱索有否病變。自左右靜脈入口處將左心房直線切開(kāi),,沿心臟左緣剖至心尖部,,再?gòu)木嚯x心尖部與心室間隔左側(cè)1cm處平行地剖開(kāi)左心室的前壁和主動(dòng)脈,檢查二尖瓣,、主動(dòng)脈瓣,、腱索有無(wú)病變,左心房,、左心室內(nèi)壁有無(wú)出血和感染,。自冠狀動(dòng)脈口起剪開(kāi)前降支和旋支,在主動(dòng)脈根部右側(cè),,于右心室的心外膜找到右冠狀動(dòng)脈主干,,先橫切一刀,再剪至后降支,;觀察有無(wú)粥樣硬化和血栓等,。
(2) 口腔。檢查牙齒的變化,,口腔黏膜的色澤,、有無(wú)外傷、潰瘍和白斑,,舌黏膜有無(wú)出血,、外傷及舌苔的情況。
(3) 咽喉,。觀察喉頭,、會(huì)厭軟骨黏膜的色澤,、淋巴結(jié)的性狀及喉囊有無(wú)積膿。
(4) 鼻腔,。檢查鼻腔和鼻中隔黏膜的色澤,、有無(wú)出血、炎性水腫,、結(jié)節(jié),、糜爛、潰瘍穿孔及疤痕等,。
(5) 下頜及頸部淋巴結(jié),。檢查下頜及頸部淋巴結(jié)的大小、硬度,、有無(wú)出血和化膿等,。
(6) 氣管。檢查氣管有無(wú)出血,、黏液量等,。
(7) 肺臟。檢查肺的色澤,、有無(wú)出血,、炎癥、肺氣腫,、肺萎縮,、腫瘤等。
(8) 其他器官,。胸腺,,甲狀腺,扁桃體等的色澤,、有無(wú)粘連,、出血、水腫等,。
4,、顱腔及腦
以猴為例,剝離顱頂部軟組織,,沿眉弓至枕外隆凸上0.5cm處的連線,,用弓形鋸環(huán)繞該線鋸開(kāi)顱骨外板及板障,然后用丁字鑿輕輕鑿開(kāi)內(nèi)板,,揭開(kāi)顱蓋,,此時(shí)可見(jiàn)覆蓋于腦表面的硬腦膜,切開(kāi)硬腦膜暴露腦組織,在距顱骨鋸口斷端上0.5cm處,,從前向后環(huán)行剪開(kāi)硬腦膜,,枕部的硬腦膜應(yīng)保留1.5cm長(zhǎng),防止取腦過(guò)程向后推壓腦組織時(shí),,枕骨斷端損壞枕葉腦組織,。向后方輕輕揭起硬腦膜及大腦鐮,暴露腦組織,,用手指從額骨前上方伸入顱前窩,,輕輕推壓大腦額葉,直至見(jiàn)到篩板上的嗅球?yàn)橹?,切斷嗅絲與嗅球的,,將嗅球與腦一齊拉起,見(jiàn)到視神經(jīng)和視交叉時(shí)立刻停止,,在腦底附近依次切斷頸內(nèi)動(dòng)脈,、視神經(jīng),再將腦向后拉,,可見(jiàn)到垂體及漏斗,繼續(xù)將腦向后拉起,,切斷連于腦的腦神經(jīng),。從腦干腹側(cè)面把手術(shù)刀伸入枕骨大孔,切斷脊髓,,即可將腦取出,,用流水沖洗干凈備用。新鮮腦很軟,,易變形和受挫傷,,操作過(guò)程中必須用手扶托,取出腦后應(yīng)立刻用紗布包裹,,浸泡固定液中保存,,以免變形。
檢查軟腦膜,、硬腦膜血管充盈情況,,腦回之間的腦溝中液體的數(shù)量與色澤,腦表面凸起或凹下的地方是否明顯,,可用手觸膜判定其硬度,。用刀將腦做一水平切面,保留胼胝體,,暴露側(cè)腦室,,注意檢查尾狀核有無(wú)出血、軟化灶。側(cè)腦室內(nèi)容物數(shù)量,、性質(zhì),,然后將腦做多處切面,檢查有無(wú)變化,。
四,、臟器測(cè)量和稱重
(1) 解剖后應(yīng)迅速將臟器稱重,以免水分蒸發(fā)造成差異,,特別是腎上腺等小器官的稱重,。
(2) 臟器稱重前應(yīng)盡量將周圍脂肪組織和結(jié)締組織剔除,并用濾紙吸去臟器表面血液及體液,,特別是腎上腺,、甲狀腺、前列腺等較小的器官,,更要新鮮稱重,,防止器官干燥失水而重量減輕。
(3) 空腔器官稱重前,,應(yīng)清除其腔內(nèi)液體,,如心臟應(yīng)除去。