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核磁共振的原理
最近更新時(shí)間:2017-9-20
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簡單的說就是,,處于一個(gè)靜磁場(chǎng)中的核子(質(zhì)子和中子),,會(huì)由于磁場(chǎng)的作用而處于不同的能量狀態(tài),當(dāng)一個(gè)外界的擺動(dòng)的磁場(chǎng)來擾動(dòng)處于“平衡”狀態(tài)的核子時(shí),,吸收了能量的核子就會(huì)從不同的能級(jí)之間要遷,,并再此過程中會(huì)釋放出能量。而放出的能量被檢測(cè)到之后,,經(jīng)過分析和計(jì)算就可以得到蛋白質(zhì)內(nèi)部的原子的結(jié)構(gòu)信息,。
進(jìn)一步解釋一下:首先不是所有的原子都是有NMR現(xiàn)象的,也不是具有了NMR現(xiàn)象就可以用于蛋白結(jié)構(gòu)解析,。象O16,,C12是沒有核磁共振現(xiàn)象的(偶數(shù)的質(zhì)子中子和偶數(shù)的電子),象H2,,N14,,NMR很難分析也很少研究。只有C13,,N15,,H1才真正的被用于研究,,并用于結(jié)構(gòu)解析。所以小一點(diǎn)的蛋白(小于10kd)因?yàn)楹凶銐虻腍,,可以直接用來NMR分析,,而更大的蛋白則需要同位素標(biāo)記,就是在M9培養(yǎng)中,,加入C13的葡萄糖,,N15的NH4cl,然后誘導(dǎo),,從而是表達(dá)出來的蛋白中的原子都是具有NMR的C13,,N15,H1,。
NMR所用到的靜磁場(chǎng),,是磁場(chǎng)非常強(qiáng)大的靜磁場(chǎng)。例如750MHz的譜儀,,它的靜磁場(chǎng)是17.5T(特斯拉),,這么強(qiáng)的磁場(chǎng)是通過電磁場(chǎng)產(chǎn)生的,我們知道螺旋線圈是可以產(chǎn)生磁場(chǎng)的,,NMR所用的就是處于超導(dǎo)狀態(tài)下的螺旋線圈中的電流產(chǎn)生的磁場(chǎng),,為了是線圈是超導(dǎo),所用要將線圈放在液氦中,,使溫度接近零度,。所以NMR要消耗大量的液氦,還有液氮(放在液氦外面),。
所以NMR是很昂貴的試驗(yàn),,*是樣品需要同位素標(biāo)記,第二是儀器非常貴重,。