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雙向電泳蛋白點(diǎn)的切取和保存
最近更新時(shí)間：2015-6-1
提 供 商：上海士鋒生物科技有限公司資料大?。?/span>50.6KB
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資料類型：未知文件瀏覽次數(shù)：875次
1. 用 PDQuest軟件或肉眼比對(duì)，找出感興趣的蛋白點(diǎn),，并做好標(biāo)記和記錄,。
2. 用 MilliQ水沖洗膠 2 次。
3. 用色譜純甲醇和 MilliQ水沖洗 Ep 管
4. 將槍頭(200μl)下端剪去,，使其內(nèi)徑略小于蛋白斑點(diǎn)的直徑,，用色譜純甲醇和MilliQ水沖洗槍頭。
5. 對(duì)準(zhǔn)斑點(diǎn)中央小心將蛋白切割下來,，放入Ep 管,，MilliQ水漂洗 2 次，如膠塊 太大,，將其切成 1 x 1 mm 的膠片,。
6. 將切好的點(diǎn)做好標(biāo)記和記錄，置- 80℃ 保存或凍干后- 20℃ 存放,。
注意事項(xiàng)：
1. 盡量避免皮膚和頭發(fā)的角蛋白的污染,，在操作過程中應(yīng)戴一次性的 PE 手套 （不用乳膠手套）和帽子。
2. 不要將膠長(zhǎng)期存放于乙酸溶液中,。
3. Ep 管及染膠的容器必須用甲醇和水充分清洗，尤其應(yīng)與進(jìn)行Western blotting 的容器分開,，以避免 casein 或 BSA 的污染,。