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細胞生物學實驗技術(shù)
最近更新時間:2014-10-8
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*節(jié)顯微技術(shù)
光學顯微鏡:以可見光(或紫外線)為光源,。
電子顯微鏡:以電子束為光源,。
一、光學顯微鏡
(一)普通光學顯微鏡
1,、構(gòu)成:
①照明系統(tǒng)
②光學放大系統(tǒng)
③機械裝置
2,、原理:經(jīng)物鏡形成倒立實像,經(jīng)目鏡進一步放大成像,。
3,、分辨力:指分辨物體zui小間隔的能力。
R=0.61λ/N.A.
其中λ為入射光線波長,;N.A.為鏡口率=nsinα/2,,n=介質(zhì)折射率;α=鏡口角(樣品對物鏡鏡口的張角) ,。
思考:如何提高顯微鏡的分辨能力,?
表一、幾種介質(zhì)的折射率
介質(zhì) 空氣 水 香柏油 α溴萘
折射率 1 1.33 1.515 1.66
顯微鏡的幾個光學特點:
制作光學鏡頭所用的玻璃折射率為1.65~1.78,,所用介質(zhì)的折射率越接近玻璃的越好,。
sin α /2的zui大值必然小于1;介質(zhì)為空氣,,鏡口率一般為0.05~0.95,;油鏡頭用香柏油為介質(zhì),,鏡口率可接近1.5。
普通光線的波長為400~700nm,,分辨力數(shù)值不會小于0.2μm,,人眼的分辨力為0.2mm,因此顯微鏡的zui大設計倍數(shù)為1000X。