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昆蟲細(xì)胞的培養(yǎng)液適應(yīng)[4階段]
最近更新時(shí)間：2014-8-21
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*階段：1．準(zhǔn)備合適體積的由25%體積新培養(yǎng)液和75%舊培養(yǎng)液（即細(xì)胞原先適應(yīng)的培養(yǎng)液）組成的混合培養(yǎng)液I,。2．將細(xì)胞以通常分裝時(shí)使用的zui低分裝密度的兩倍分裝到混合培養(yǎng)液I中。3．使細(xì)胞生長(zhǎng)到通常培養(yǎng)時(shí)的較高密度,，監(jiān)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)參數(shù),。4．繼續(xù)以步驟2中的密度分裝細(xì)胞到新鮮的混合培養(yǎng)液I中，直到生長(zhǎng)參數(shù)達(dá)到可以接受的水平,。有時(shí)候分裝一次就可達(dá)到要求,。5．一旦細(xì)胞穩(wěn)定下來(lái)，以通常使用的zui低分裝密度分裝細(xì)胞至新鮮的混合培養(yǎng)液I中,，同樣監(jiān)測(cè)細(xì)胞參數(shù),。6．細(xì)胞達(dá)到較高密度后，繼續(xù)以步驟5中的分裝密度把細(xì)胞分裝到新鮮的混合培養(yǎng)液I中,，直到細(xì)胞的生長(zhǎng)參數(shù)達(dá)到可以接受的水平,。7．如果細(xì)胞恢復(fù)到正常狀態(tài)，進(jìn)行第二階段的實(shí)驗(yàn),。8．如果細(xì)胞不能達(dá)到正常狀態(tài),，新培養(yǎng)液可能不適于培養(yǎng)這種細(xì)胞。9．如果細(xì)胞在新培養(yǎng)液中的生長(zhǎng)參數(shù)達(dá)到平衡狀態(tài),，雖然與正常狀態(tài)不同,，但是可以為實(shí)驗(yàn)接受，也可進(jìn)行第二階段的實(shí)驗(yàn),。第二階段：1．準(zhǔn)備適量的由50%新培養(yǎng)液和50%舊培養(yǎng)液組成的混合培養(yǎng)液II,。2．將細(xì)胞以兩倍zui低分裝密度分裝至混合培養(yǎng)液II中。3．如*階段一樣,，監(jiān)測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)指數(shù)，使細(xì)胞達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài),。然后將分裝密度降到zui低分裝密度,，再使細(xì)胞達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。第三階段：步驟同*階段和第二階段,，使細(xì)胞適應(yīng)混合培養(yǎng)液III（75%新培養(yǎng)液和25%舊培養(yǎng)液）,。第四階段：1．步驟同*階段、第二階段和第三階段,，使細(xì)胞適應(yīng)新培養(yǎng)液,。2．當(dāng)細(xì)胞在新培養(yǎng)液中達(dá)到穩(wěn)定后，監(jiān)測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)指數(shù),，看是否波動(dòng)過(guò)大,。