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技術(shù)文章
士鋒PVDF膜上蛋白的可逆染色
點(diǎn)擊次數(shù):1095 發(fā)布時(shí)間:2015-6-29
Western雜交時(shí),,為確認(rèn)蛋白是否轉(zhuǎn)至PVDF膜上,可用下列方法對(duì)膜上蛋白進(jìn)行可逆性染色,。
1. 氨基黑染色
染液:0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropanol (v/v) and 10% acetic acid.
染色:將PVDF膜置于染液中染色數(shù)鐘,,ddH2O 脫色。
2. 考馬氏亮藍(lán)染色
染液:0.1% Coomassie Brilliant Blue R-250 (w/v) and 50% methanol (v/v)
脫色液:40% methanol (v/v) with 10% acetic acid (v/v)
染色:將PVDF膜置于染液中染色15 min.,脫色液脫色,。
3. 麗春紅染色Ponceau S
染液:0.2% w/v Ponceau S in TCA (3% v/v)
染色:將PVDF膜置于染液中染色5min
脫色:ddH2O 脫色