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技術(shù)文章
臺盼藍染色法
點擊次數(shù)：1262 發(fā)布時間：2014-12-22
材料：
1. 顯微鏡,、玻片、蓋玻片,、滴管,；
2. 試劑：0.4%臺盼藍染液；
3. 臺盼藍（Trypan blue）：0.4g,；
4. 生理鹽水：100ml,；
操作步驟：
1. 用Hanks液配制0.1%臺盼藍溶液,；
2. 用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液來消化培養(yǎng)的貼壁細胞；
3. 再加入適量Hanks液制成細胞懸液,；
4. 將待染色細胞稀釋至所需濃度（方法及濃度范圍與細胞計數(shù)相同）,；
5. 每0.1ml細胞懸液約加新鮮配制的染液一小滴，室溫下染3—5min,；
6. 染色過的細胞材料,，取一滴細胞懸液置玻片上，加蓋玻片后放高倍鏡下觀察,；
7. 死亡的細胞著淺藍色并膨大,，無光澤?；罴毎恢⒈３终Ｐ螒B(tài),，有光澤；
8. 計數(shù)1000個細胞中的活細胞和死細胞數(shù)目,；
9. 統(tǒng)計未染色細胞,。可按公式計算出細胞活率,。
細胞活率（%）=未染色的細胞數(shù)/觀察的細胞總數(shù)×100,。