會(huì)員.png)
QQ交談
您所在位置：請(qǐng)輸入產(chǎn)品關(guān)鍵字：
郵編：200431
聯(lián)系人：王小姐
電話：021-56640936
傳真：021-33250231
手機(jī)：13122441390 15900755943
留言：發(fā)送留言
個(gè)性化：www.shifengsj.com
網(wǎng)址：www.shfeng-edu.com
商鋪：http://sorrent.com.cn/st236594/
培養(yǎng)細(xì)胞活力測(cè)定
點(diǎn)擊次數(shù)：998 發(fā)布時(shí)間：2014-11-20
培養(yǎng)細(xì)胞活力測(cè)定是腫瘤體外研究中應(yīng)用zui廣的技術(shù)手段之一,。
任何培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)生長(zhǎng)的細(xì)胞都由死細(xì)胞和活細(xì)胞組成，從形態(tài)上區(qū)別死,、活細(xì)胞是困難的,。
方法：四唑鹽（MTT）比色法
四唑鹽（MTT）商品名為噻唑藍(lán)
四唑鹽比色法的原理：活細(xì)胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶干水的藍(lán)紫色產(chǎn)物（formazan）,，并沉淀在細(xì)胞中,，而死細(xì)胞沒有這種功能。二甲亞砜（DMSO）能溶解沉積在細(xì)胞中藍(lán)紫色結(jié)晶物,，溶液顏色深淺與所含的formazan（甲月替）量成正比,。再用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值。
MTT法簡(jiǎn)單快速,、準(zhǔn)確,，廣泛應(yīng)用于新藥篩選、細(xì)胞毒牲試驗(yàn),、腫瘤放射敏感性實(shí)驗(yàn)等,。
操作步驟
（1）100μL單細(xì)胞懸液接種于96孔板（5×104）,。37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間（根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康臎Q定培養(yǎng)時(shí)間）
（2）加入2mg/ml的MTT液（50μL/孔）,；繼續(xù)培養(yǎng)3小時(shí),。
（3）吸出孔內(nèi)培養(yǎng)液后，加入DMSO液（150μL/孔）,，將培養(yǎng)板置于微孔板扳蕩器上振蕩10分鐘,，使結(jié)晶物溶解。
（4）酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔OD值（檢測(cè)波長(zhǎng)570納米）,。記錄結(jié)果,，繪制。