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技術文章
骨髓細胞染色體標本制備
點擊次數：938 發(fā)布時間：2014-8-25
一、原理
骨髓染色體標本制備通常用于白血病患者,，特別是慢性或急性粒細胞性白血病,，因為骨髓反映粒系統(tǒng)細胞增生情況，這些病人不宜用外周血,。即使是淋巴細胞性白血病,，也不主張用外周血,，因為加PHA刺激外周血培養(yǎng),，只能獲得正常淋巴細胞分裂相，并不能反映那些病理淋巴細胞的染色體改變,。 骨髓細胞屬不斷增殖的細胞,，培養(yǎng)可分短期培養(yǎng)和直接制片法，無論哪種其培養(yǎng)液中均不需加PHA。
二,、用品和試劑
同外周血染色體制備,。
三、操作步驟
（一）短期培養(yǎng)法
1．取材,、培養(yǎng)：從髂骨取骨髓液0.2—0.5ml,，無菌注入裝有5ml培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中，37℃培養(yǎng)23—25小時后,，加入秋水仙堿（終濃度為0.07μg/ml）,，繼續(xù)培養(yǎng)3—4小時，收獲,。
2．染色體制片：低滲,、固定、制片及染色同實驗一,。
（二）直接制備法
1．從髂骨抽取0.3—0.5ml,，立即注入濃度為0.07μg/ml的秋水仙堿的生理鹽水5ml中，以吸管輕輕吸動,，將骨髓中脂肪顆粒充分吸掉,，1000rpm離心8分鐘，棄上清,。
2．加入同樣濃度的秋水仙堿生理鹽水2—3ml,，室溫放置2—3小時，離心棄上清,。 3．染色體制片：低滲,、固定、制片及染色同外周血染色體制備,。