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士鋒生物具體層析方法：氣相色譜層析
點(diǎn)擊次數(shù)：807 發(fā)布時(shí)間：2014-5-23
1)載氣 常用的載氣主要有氮,、氬、氫和二氧化碳等,。這些氣體一般都由高壓氣瓶供給
(2)進(jìn)樣器 氣相色譜儀可以用于分離固相,、氣相和液相標(biāo)本。液相標(biāo)本采用微升注射器穿過橡皮隔片注入,，氣相標(biāo)本采用特種氣相注射器注入,。
(3)譜柱及加熱爐 色譜柱一般由金屬或玻璃制成，通常采用的柱長(zhǎng)2m~4m,，內(nèi)徑2mm,，毛細(xì)管柱長(zhǎng)度可達(dá)20m～150m，內(nèi)徑為0.2mm,。
載體一般采用惰性,、多孔的固體顆粒。多由硅藻土或玻璃珠制成,，分析不同極性的微生物化合物,，為了獲得zui適的分離條件，要求有不同固定相的載體,。目前比較常用的載體有：聚乙二醇(CarbOwax 20M),、F F A P(聚乙二醇20M 和2-硝基對(duì)苯二甲酸的反應(yīng)產(chǎn)物)，OV-17(苯基甲基硅酮),。OV-210,、SE-30(甲基硅酮)、Chromosorb G(白色硅藻土載體)等,。柱加熱爐在溫度控制上是非常重要,。
(4)紀(jì)錄儀
(5)數(shù)據(jù)處理裝置 一般均附有數(shù)據(jù)處理計(jì)算機(jī)。
試驗(yàn)條件的選擇
(1)柱的選擇 要注意極性及zui高使用溫度,，柱溫不能超過zui高使用溫度,。固定相按極性相似的原則選擇。
色譜柱的內(nèi)徑大小,、長(zhǎng)度都能影響分離率,。一般而言，內(nèi)徑越小,，長(zhǎng)度越長(zhǎng),，分離效果越好，一般柱長(zhǎng)為1m～5m(毛細(xì)管柱則20m～100m),。
填充劑顆粒一般采用40目～60目,，60目～80目及80目～100目大小。長(zhǎng)柱子宜用粒度大些的，以減少柱壓降,，短柱子則用粒度細(xì)的,。
氣相色譜中固定液的含量對(duì)分離效率的影響較大。一般采用固定液與載體重量之比為15︰100～25︰100,。采用高靈敏度的檢測(cè)器,，由于進(jìn)樣量減少，固定液含量可以降至5︰100以下,。這樣可以使用較低柱溫,，從而提高柱效，縮短分析時(shí)間,。但固定液用量太少會(huì)引起吸附,。
(2)柱溫選擇 柱溫選擇對(duì)分離度影響很大，常是條件選擇的關(guān)鍵,。選擇的基本原則是：在使zui難分離的組分有盡可能好的分離高度的前提下，盡可能采取較低溫度,，但以保留時(shí)間適宜及不拖尾為度,。
①高沸點(diǎn)混合物(200℃～400℃)，若需在較低的柱溫下分析,，可采用低固定液配比1％～3%,，采用高靈敏檢測(cè)器，柱溫可比沸點(diǎn)低100℃～150℃,，在200℃～250℃的柱溫下分析,。