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上海士鋒生物科技有限公司

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技術(shù)文章

士鋒生物液相色譜儀常規(guī)分析操作步驟

點(diǎn)擊次數(shù):903 發(fā)布時(shí)間:2014-4-17

液相色譜儀操作步驟:  
1)過(guò)濾流動(dòng)相,,根據(jù)需要選擇不同的濾膜。 

2)對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘,。 

3)打開hplc工作站(包括計(jì)算機(jī)軟件和色譜儀),,連接好流動(dòng)相管道,連接檢測(cè)系統(tǒng),。 

4)進(jìn)入HPLC控制界面主菜單,,點(diǎn)擊manual,進(jìn)入手動(dòng)菜單,。 

5)有一段時(shí)間沒用,,或者換了新的流動(dòng)相,需要先沖洗泵和進(jìn)樣閥,。沖洗泵,,直接在泵的出水口,用針頭抽取,。沖洗進(jìn)樣閥,,需要在manual菜單下,先點(diǎn)擊purge,,再點(diǎn)擊start,,沖洗時(shí)速度不要超過(guò)10 ml/min。 

6)調(diào)節(jié)流量,,初次使用新的流動(dòng)相,,可以先試一下壓力,流速越大,,壓力越大,,一般不要超過(guò)2000。點(diǎn)擊injure,,選用合適的流速,,點(diǎn)擊on,,走基線,,觀察基線的情況,。 

7)設(shè)計(jì)走樣方法。點(diǎn)擊file,,選取select users and methods,,可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個(gè)新的方法,,點(diǎn)擊new method,。選取需要的配件,包括進(jìn)樣閥,,泵,,檢測(cè)器等,根據(jù)需要而不同,。選完后,,點(diǎn)擊protocol。一個(gè)完整的走樣方法需要包括:a.進(jìn)樣前的穩(wěn)流,,一般2-5分鐘,;b.基線歸零;c.進(jìn)樣閥的loADIng-inject轉(zhuǎn)換,;d.走樣時(shí)間,,隨不同的樣品而不同。 

8)進(jìn)樣和進(jìn)樣后操作,。選定走樣方法,,點(diǎn)擊start。進(jìn)樣,,所有的樣品均需過(guò)濾,。方法走完后,點(diǎn)擊postrun,,可記錄數(shù)據(jù)和做標(biāo)記等,。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線,,洗掉剩余物,。 

9)關(guān)機(jī)時(shí),先關(guān)計(jì)算機(jī),,再關(guān)液相色譜,。 

10)填寫登記本,由負(fù)責(zé)人簽字,。 

注意事項(xiàng): 

1)流動(dòng)相均需色譜純度,,水用20M的去離子水,。脫氣后的流動(dòng)相要小心振動(dòng)盡量不引起氣泡。 
2)柱子是非常脆弱的,,*次做的方法,,先不要讓液體過(guò)柱子。 
3)所有過(guò)柱子的液體均需嚴(yán)格的過(guò)濾,。 
4)壓力不能太大,,不要超過(guò)2000 psi 

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