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技術(shù)文章

士鋒生物植物細(xì)胞死活鑒定

點(diǎn)擊次數(shù):810 發(fā)布時(shí)間:2014-3-25

1、 用質(zhì)壁分離法鑒定細(xì)胞死活
(1) 原理
活細(xì)胞與死細(xì)胞在性質(zhì)上有許多差別,,特別是透性的變化zui為明顯,,活細(xì)胞的原生質(zhì)具有分別透性;而死細(xì)胞則為通透性,。分別透性是質(zhì)壁分離的先決條件,,因此能發(fā)生質(zhì)壁分離的細(xì)胞就表示是活的,不能發(fā)生質(zhì)壁分離的則說(shuō)明是死的,。
(2) 儀器藥品及材料
洋蔥及其它植物材料,、酒精燈、顯微鏡,、小刀,、鑷子、玻璃片,、1M蔗糖
(3) 實(shí)驗(yàn)步驟
撕洋蔥表皮細(xì)胞滴加1M蔗糖中,,在顯微鏡下觀察,細(xì)胞很快發(fā)生質(zhì)壁分離的,,這就是活細(xì)胞活著的證據(jù),。另把撥取的同樣制片,用冷凍,,加熱,,干燥,酒精浸蘸等辦法將它們的細(xì)胞殺死,,然后取代上述活材料,,做質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn),結(jié)果看到已死的細(xì)胞,,不能發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象,。
用尿素、KNO3,、CaCl2等來(lái)代替蔗糖,,能快速鑒定細(xì)胞死活。

2,、 活體染色法鑒定細(xì)胞死活
(1)原理
死活細(xì)胞間不但透性不同,,而且PH等情況也不同,他們對(duì)某些染料的反映明顯不同,某些染料能在活細(xì)胞的細(xì)胞液中積累而不染活原生質(zhì),,但能使死細(xì)胞的原生質(zhì)染色而無(wú)積累于液泡的現(xiàn)象,,所以可根據(jù)某些染料活體染色的情況來(lái)鑒定細(xì)胞死活。
(2)儀器,、藥品及材料
顯微鏡,、鑷子、載玻片,、刀片,、0.01%中性水溶液、1M蔗糖溶液,、小麥,、洋蔥、水稻,、白菜,、棉花或其它植物。
(3)實(shí)驗(yàn)步驟
(4)取洋蔥或其它材料,,用鑷子撕下表皮(如表皮不易撕下,,也可在水中用鋒利的刀片輕輕刮去多余分部分),或用刀片作切片若干,,將表皮或切片浸入中性溶液5-10分鐘,,取出用清水浸洗后置于載玻片水滴內(nèi),加蓋玻片,,在顯微鏡下觀察,。

活細(xì)胞一般在液泡內(nèi)染成紅色至紫色,原生質(zhì)不染色,,死細(xì)胞常成橙紅色,原生質(zhì)和細(xì)胞核染色,。撕破的細(xì)胞,,只剩細(xì)胞壁時(shí),呈淡紅色或淡紫色,。
為了進(jìn)一步鑒別死活,,可把玻片上的水溶液吸去,滴一滴1M蔗糖溶液,,便可觀察到活細(xì)胞能發(fā)生質(zhì)壁分離,,死細(xì)胞及空細(xì)胞都沒(méi)有這種現(xiàn)象。
可用加熱,,冷凍或其它辦法殺死植物組織,,然后用上面所述方法進(jìn)行處理,比較與活組織有何不同,。
記錄結(jié)果,,并加以解釋,。

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