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士鋒生物微量定容測(cè)壓法測(cè)定植物的呼吸速率
點(diǎn)擊次數(shù)：1026 發(fā)布時(shí)間：2014-3-10
一,、原理
微量檢壓計(jì)不僅用來研究有機(jī)體或部分組織的呼吸作用和發(fā)酵作用，而且也可以研究有關(guān)O2與CO2及其它氣體交換的反應(yīng),。如光合作用,，酶的活性等。測(cè)壓法的原理是在固定體積并保持恒溫的密閉系統(tǒng)中,，氣體產(chǎn)生或消失的總量,，可以利用氣體定律計(jì)算求得。
二,、材料、儀器設(shè)備及試劑
（一）材料：待測(cè)的小麥,、水稻萌發(fā)種子,。
（二）儀器設(shè)備：1. 瓦布格呼吸計(jì)（微量呼吸檢質(zhì)計(jì)）；2. 移液管,；3. 量筒,；4. 小鑷子；5. 稱量瓶,。
（三）試劑：1. 20％KOH,；2. 凡士林；3. 橡皮筋數(shù)根,；4. 吸水紙,；5. Brodie氏溶液：NaCl 23g，牛膽酸鈉5g,，溶于500ml水中,，另加少許染料（酸性品紅）使溶液染色，并加數(shù)滴濃麝香草酚酒精溶液作為防腐劑,。
三,、實(shí)驗(yàn)步驟
（一）種子吸氧量的測(cè)定
1. 取不同處理種子若干（體積約0.5ml左右），稱其鮮重,，然后用排水法測(cè)定其體積,，先用濾紙將種子外面水分吸干,，另取10ml量筒一個(gè)，內(nèi)盛4～5ml的水,，將種子放入量筒內(nèi)觀察水分上升體積,，二次水分體積之差即為種子體積，將種子取出,，用濾紙吸干附在種子外表的水分,，然后將種子放入反應(yīng)瓶的底部，再加0.5ml水
2. 在中央小槽內(nèi)加入20％KOH0.2ml,，為了增大吸收CO2的能力,，可用1×2cm濾紙折疊后插入中央小槽內(nèi)。并在中央小槽口上涂上少量凡士林,，防止堿液逸出,。
3. 側(cè)管的玻璃棒涂以凡士林后塞緊。壓力計(jì)口亦涂上凡士林和反應(yīng)瓶連接,，轉(zhuǎn)動(dòng)反應(yīng)瓶,，使封口凡士林呈透明為止，然后用橡皮筋將反應(yīng)瓶固定在壓力計(jì)上,。
4.將壓力計(jì)固定在水槽上,，并打開活塞，平衡10～15min,，在此過程中要檢查反應(yīng)瓶是否漏氣,。
（二）空白試驗(yàn)（作溫壓計(jì)用）：因壓力計(jì)左管口是與大氣相通，實(shí)驗(yàn)時(shí)室內(nèi)氣壓或水槽溫度微小變化對(duì)讀數(shù)均有影響,，為此,，必須進(jìn)行校正。校正方法：即反應(yīng)瓶中除不加種子外,，其他處理與測(cè)壓計(jì)*相同,。
（三）測(cè)定：當(dāng)反應(yīng)瓶?jī)?nèi)溫度與水槽溫度平衡后，將壓力計(jì)上的活塞關(guān)閉,。開始振蕩,。并記錄開始時(shí)間，每隔15min記錄測(cè)壓計(jì)及溫壓計(jì)左管液面高度,，讀數(shù)時(shí)關(guān)閉振蕩器,，并將壓力計(jì)的右管液面調(diào)至150mm處，再記錄左管液面高度,，共計(jì)四次（共1h,，讀數(shù)時(shí)不能將活塞打開！）將結(jié)果按下表記錄。
四,、結(jié)果計(jì)算（一）求K值（二）根據(jù)實(shí)際壓力差值（h1.求氧的吸收量（μl）＝h×K,；
計(jì)算呼吸速率（耗O2）呼吸速率（μl/g/h）＝h×K/