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技術(shù)文章

士鋒生物質(zhì)壁分離法測(cè)定植物細(xì)胞的滲透勢(shì)

點(diǎn)擊次數(shù):963 發(fā)布時(shí)間:2014-3-3

將植物組織放入一系列不同濃度的蔗糖溶液中,經(jīng)過一段時(shí)間,,植物細(xì)胞與蔗糖溶液間將達(dá)到滲透平衡狀態(tài),。如果在某一溶液中細(xì)胞脫水達(dá)到平衡時(shí)剛好處于臨界質(zhì)壁分離狀態(tài),則細(xì)胞的壓力勢(shì)ψp下降為零,。此時(shí)細(xì)胞液的滲透勢(shì)ψs等于外液的滲透勢(shì)ψs0,,即ψs=ψs0,此溶液稱為該組織的等滲溶液,,其濃度稱為該組織的等滲濃度,,因此,只要測(cè)出植物組織的等滲濃度,,即可計(jì)算出細(xì)胞液的滲透勢(shì)ψs,。實(shí)際測(cè)定時(shí),由于臨界質(zhì)壁分離狀態(tài)難以在顯微鏡下直接觀察到,,故一般均以初始質(zhì)壁分離作為判斷等滲濃度的標(biāo)準(zhǔn),。處于初始質(zhì)壁分離狀態(tài)的細(xì)胞體積,比吸水飽和時(shí)略小,,故細(xì)胞液濃縮而滲透勢(shì)略低于吸水飽和時(shí)的滲透勢(shì),,此種狀態(tài)下的滲透勢(shì)稱基態(tài)滲透勢(shì)。
【儀器與用具】
顯微鏡1臺(tái),;載玻片與蓋玻片各若干,;溫度計(jì)1支;尖頭鑷子1把,;刀片1片,;小培養(yǎng)皿(直徑6cm)9套;試劑瓶若干,;燒杯,、容量瓶、量筒,、吸管等,;吸水紙適量。
【試劑】
1mol/kg H2O蔗糖溶液 稱取預(yù)先在60~80℃下烘干的蔗糖34.2g溶于100g蒸餾水中,,即為1質(zhì)量摩爾濃度蔗糖溶液,。
蔗糖系列標(biāo)準(zhǔn)液 取干燥潔凈的小試劑瓶9支編號(hào),用1mol/kg H2O蔗糖溶液依C1V1=C2V2公式配制0.30,、0.35,、0.40、0.45,、0.50,、0.55,、0.60、0.65,、0.70mol/kg H2O等一系列不同濃度的蔗糖溶液(具體范圍可根據(jù)材料不同而加以調(diào)整),,貯于試劑瓶中,瓶口加塞以防蒸發(fā)濃縮,。
0.03%中性紅溶液,。
【方法】
1.選大蔥或洋蔥鱗莖內(nèi)表皮、小麥葉片等作實(shí)驗(yàn)材料,。
2.取干燥潔凈的培養(yǎng)皿9套編號(hào),,將配制好的不同濃度蔗糖溶液按順序加入各培養(yǎng)皿中使成一薄層,蓋好培養(yǎng)皿蓋備用,。
3.用鑷子剝?nèi)」┰嚥牧舷卤砥せ蛴玫镀⌒墓稳⌒←溔~片上表皮(參考實(shí)驗(yàn)1),,大小以0.5cm2為宜。吸去切片表面水分,,立即浸入不同濃度的蔗糖溶液中,,每一濃度4~5片。
為便于觀察,,可先將切片于0.03%中性紅內(nèi)染色5min左右,,吸去水分,再浸入蔗糖溶液中,,但如不加染色即能區(qū)別質(zhì)壁分離時(shí),仍以不染色為宜,。

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