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技術(shù)文章

實(shí)驗(yàn)技巧:流式細(xì)胞儀細(xì)胞周期結(jié)果分析

點(diǎn)擊次數(shù):3352 發(fā)布時(shí)間:2013-7-24

*張是未轉(zhuǎn)染的第12代,,第二章是轉(zhuǎn)染后的第22代,。

*張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%

第二張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%

據(jù)此分析兩者的增值沒有明顯的差別。雖然第二張圖比*張圖的S期有所增高,,但G2期下降了,。

細(xì)胞周期是基于細(xì)胞處于不同分裂時(shí)期具有不同的DNA含量而分析細(xì)胞處于不同的時(shí)期的方法。確切的說結(jié)果中G1期的百分比實(shí)際上是G1+G0期細(xì)胞的百分比,。 G2的百分比實(shí)際上是G2+M期細(xì)胞的百分比,。

圖上zui高的峰代表了G1期(也稱2倍體峰),后面的代表G2期,、S期(也稱4倍體峰),。

1、細(xì)胞周期的概念

細(xì)胞由一次分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束,,都要經(jīng)歷相同的變化階段(即G1→S→G2→M )周而復(fù)始地進(jìn)行活動(dòng),,細(xì)胞的這種生長、分裂循環(huán)即稱為細(xì)胞周期(cell cyc1e),。一個(gè)細(xì)胞周期包括有絲分裂期(M)和分裂間期(G1,、S、G2),。盡管在各種細(xì)胞中各期所占時(shí)間都不盡相同,,但相對(duì)而言M期zui短,S期卻較長,。

2,、分裂間期

(1)G1期

前一次有絲分裂完成到S期開始。各種與DNA復(fù)制有關(guān)的酶明顯增多,線粒體,、葉綠體,、核糖體增多,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在更新擴(kuò)大,,高爾基體,、溶酶體都增加,中心粒彼此分離,、復(fù)制,。

(2)S期

DNA、組蛋白合成

(3)G2期

S期結(jié)束后到有絲分裂開始,。由上可以看出G2期,、S期、M期反映了細(xì)胞的增殖活性,,特別是G2期,、S期(因M期較短)。因而,,G2/M%+S%反映了細(xì)胞增殖能力,。二者有無差別要進(jìn)行統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)。

3,、細(xì)胞周期阻滯

對(duì)于生殖細(xì)胞及保持增殖能力的細(xì)胞(如干細(xì)胞),,由于細(xì)胞不斷的增殖, 細(xì)胞總是處于從G1 ,、S,、G2 和M 期的連續(xù)的細(xì)胞周期中。 在細(xì)胞周期的各階段,, 細(xì)胞分別進(jìn)行著DNA 復(fù)制,、蛋白質(zhì)合成細(xì)胞分裂等重要的生理活動(dòng)。每一階段都是下一階段的準(zhǔn)備期,, 真核細(xì)胞可以在啟動(dòng)下一個(gè)周期前監(jiān)測(cè)與一個(gè)細(xì)胞周期順利完成相關(guān)的生化事件,,這包括各種體內(nèi)外因素威脅下游事件進(jìn)行時(shí)可逆地將細(xì)胞周期阻滯在特定的生理階段的能力,而這種特定的生理階段稱為檢定點(diǎn)(checkpoint) ,。只有前一階段的生理活動(dòng)完成后,,才能通過稱為檢定點(diǎn)的階段,進(jìn)入周期的下一步,,一些突發(fā)事件引發(fā)的細(xì)胞反應(yīng)能影響驅(qū)動(dòng)細(xì)胞周期前進(jìn)的因子,,從而使細(xì)胞周期停滯在檢定點(diǎn), 這被稱為細(xì)胞周期阻滯(cell cycle arrest),。

比較相應(yīng)的細(xì)胞G1 ,、S,、G2 期差異有無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,才能說有無細(xì)胞周期阻滯,。

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