QQ交談
您所在位置：請輸入產品關鍵字：
郵編：200431
聯(lián)系人：王小姐
電話：021-56640936
傳真：021-33250231
手機：13122441390 15900755943
留言：發(fā)送留言
個性化：www.shifengsj.com
網(wǎng)址：www.shfeng-edu.com
商鋪：http://sorrent.com.cn/st236594/
總結常用6種耐熱DNA聚合酶
點擊次數(shù)：1686 發(fā)布時間：2013-4-23
耐熱DNA聚合酶多應用在PCR技術中,。各種耐熱DNA聚合酶均具有5'-3'聚合酶活性,，但不一定具有3'-5'和5'-3'的外切酶活性。3'-5'外切酶活性可以消除錯配,，切平末端;5'-3'外切酶活性可以消除合成障礙,。由于上述這些不同，可以將耐熱DNA聚合酶分為三類：
一,、普通耐熱DNA聚合酶
Taq DNA 聚合酶
由一種水生棲熱菌yT1株分離提取出,，是發(fā)現(xiàn)的耐熱DNA聚合酶中活性zui高的一種,，達200,000單位/mg。具有5'-3'外切酶活性,，但不具有3'-5'外切酶活性,，因而在合成中對某些單核苷酸錯配沒有校正功能。
TaqDNA聚合酶還要具有非模板依賴性活性,，可將PCR雙鏈產物的每一條鏈3'加入單核苷酸尾,，故可使PCR產物具有3'突出的單A核苷酸尾;另一方面，在僅有dTTP存在時,，它可將平端的質粒的3'端加入單T核苷酸尾,，產生3'端突出的單T核苷酸尾。應用這一特性,，可實現(xiàn)PCR產物的T-A克隆法,。
Tth DNA 聚合酶
從Thermus thermophilus HB8中提取而得，該酶在高溫和MnCl2條件下,，能有效地逆轉錄RNA;當加入Mg2+后,，該酶的聚合活性大大增加，從而使cDNA合成與擴增可用一種酶催化,。
二,、高保真DNA聚合酶
pfu DNA 聚合酶
是從Pyrococcus furiosis中精制而成的高保真耐高溫DNA聚合酶，它不具有5'-3'外切酶活性,，但具有3'-5'外切酶活性,，可校正PCR擴增過程中產生的錯誤，使產物的堿基錯配率極低,。PCR產物為平端,，無3'端突出的單A核苷酸。
Vent DNA 聚合酶
該酶是從Litoralis棲熱球菌中分離出的,，不具有5'-3'外切酶活性，但具有3'-5'外切酶活性,，可以去除錯配的堿基,，具有校對功能。
三,、DNA序列測定中應用的耐熱DNA聚合酶
Bca Best DNA 聚合酶
從Bacillus Caldotenax YT-G菌株中提純,，并使其5'-3'外切酶活性缺失的DNA聚合酶。它的伸長性能*;可抑制DNA二級結構形成,，可以得到均一的DNA測序帶,。
Sac DNA 聚合酶
從酸熱浴流化裂片菌中分離，無3'-5'外切酶活性,，可用于DNA測序,，但測序反應中ddNTP/dNTP的比率要高,。