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PBS和D-PBS緩沖溶液的配制方法
點(diǎn)擊次數(shù)：5922 發(fā)布時(shí)間：2013-3-17
磷酸鹽緩沖液（簡(jiǎn)稱PBS）的是生物化學(xué)中常用的一種阻礙溶液pH變化的緩沖溶液,，這種由鹽溶液中含有氯化鈉，磷酸鹽,，磷酸鹽，氯化鉀和磷酸鉀組成,。組份濃度：137 mM 氯化鈉,，2.7 mM 氯化鉀，10 mM 磷酸二氫鈉,，2 mM 磷酸二氫鉀,。本文總結(jié)了PBS和D-PBS溶液的配制方法。
1,、常規(guī)PBS磷酸鹽緩沖液
組成成份
磷酸二氫鉀 34g
1mol/L氫氧化鈉溶液 175ml
蒸餾水 825ml
PH 7.2
配置:先將磷酸鹽溶解于500mL蒸餾水中,，用1mol/L氫氧化鈉溶液校正pH后，再用蒸餾水稀釋至1000mL,。
稀釋液
取儲(chǔ)存液1.25mL,，用蒸餾水稀釋至1000mL。分裝每瓶100mL或每管10mL,，121℃高壓滅菌15min,。
用途
主要用于一些化學(xué)實(shí)驗(yàn)中不影響實(shí)驗(yàn)反應(yīng)的情況下調(diào)節(jié)pH值，以便讓實(shí)驗(yàn)的化學(xué)反應(yīng)在*條件下進(jìn)行,。部分用于食品或是飼料行業(yè)加工,，如食品或者飼料真菌毒素檢驗(yàn)中Elisa方法的洗板應(yīng)用或者食品微生物檢驗(yàn)中的稀釋緩沖液。
2,、PBS Buffer的配制具體步驟
組份濃度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4
配制量：1 L
配制方法：
1. 稱量下列試劑,，置于1 L燒杯中。
NaC l8g
KCl 0.2g
Na2HPO4 1.42g
KH2PO4 0.27g
2. 向燒杯中加入約800 ml的去離子水,，充分?jǐn)嚢枞芙狻?/p>
3. 滴加濃鹽酸將pH值調(diào)節(jié)至7.4,，然后加入去離子水將溶液定容至1 L。
4. 高溫高壓滅菌后,，室溫保存,。
注意：上述PBS Buffer中無二價(jià)陽(yáng)離子,，如需要，可在配方中補(bǔ)充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2,。
3,、D-PBS是杜氏磷酸緩沖液
全稱為：Dulbecco's Phosphate Buffered Saline
組分 分子量 濃度 （gm/L） 摩爾濃度 （mM）
氯化鉀 （KCl） 75 0.20 2.67
磷酸二氫鉀 （KH2PO4） 136 0.20 1.47
氯化鈉 （NaCl） 58 8.00 138.00
磷酸氫二鈉 （Na2HPO4） 142 1.15 8.10
pH值為7.4。
（1）,、杜氏磷酸鹽緩沖液（Dulbecco's Phosphate Buffered Saline,，D-PBS）也是一種磷酸鹽緩沖液，與常規(guī)PBS的不同之處在于磷酸鹽的含量稍低些,，并含有鈣鎂離子,。D-PBS主要用于胚胎學(xué)方面的研究，多用于胚胎的沖洗液,、凍存液和培養(yǎng)液,。
（2）、D-PBS配方：氯化鈉8g,，氯化鉀0.2g,，磷酸氫二鈉1.15g，磷酸二氫鉀0.2g,，氯化鈣0.1g,，含6個(gè)結(jié)晶水的氯化鎂0.1g溶于1L ddH2O中。
（3）,、以上配方為含有鈣鎂離子的D-PBS,，如不加氯化鈣和氯化鎂，即為無鈣鎂的D-PBS,。
（4）,、在以上配方的基礎(chǔ)上，還可以加入葡萄糖,、丙酮酸鈉等,，以更利于培養(yǎng)物的生長(zhǎng)。
D-PBS是杜氏磷酸緩沖液,，也是一種磷酸鹽緩沖液,，與常規(guī)磷酸緩沖液zui大的不同點(diǎn)在于磷酸鹽的含量稍低些，根據(jù)是否含鈣鎂分為兩種即D-PBS w/鈣 & 鎂和D-PBS w/o 鈣 &鎂