QQ交談
您所在位置：請輸入產(chǎn)品關(guān)鍵字：
郵編：200431
聯(lián)系人：王小姐
電話：021-56640936
傳真：021-33250231
手機：13122441390 15900755943
留言：發(fā)送留言
個性化：www.shifengsj.com
網(wǎng)址：www.shfeng-edu.com
商鋪：http://sorrent.com.cn/st236594/
犬細(xì)小病毒（CPV）抗體酶聯(lián)免疫（ELISA）試劑盒使用說明書
點擊次數(shù)：1150 發(fā)布時間：2012-10-12
犬細(xì)小病毒（CPV）抗體酶聯(lián)免疫（ELISA）
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用,。
上海士鋒生物科技有限公司長期經(jīng)營Elisa試劑盒,、實驗耗材,、抗體、細(xì)胞等生物化學(xué)試劑,。價格實惠,，質(zhì)量有保證,信譽*。敬請咨詢! ：：
實驗原理：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法（ELISA）測定標(biāo)本中犬細(xì)小病毒（CPV） 抗體,。用純化的犬細(xì)小病毒（CPV）抗原包被微孔板,，制成固相抗原，可與樣品中細(xì)小病毒（CPV） 抗體相結(jié)合,，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的細(xì)小病毒（CPV）抗原結(jié)合,，形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，與CUTOFF值相比較,，從而判定標(biāo)本中犬細(xì)小病毒（CPV）抗體的存在與否。
試劑盒組成：
| 1 | 20倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 3ml×1瓶 |
| 2 | 酶標(biāo)試劑 | 3ml×1/瓶 | 8 | 陽性對照 | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×4條 | 9 | 陰性對照 | 0.5ml×1瓶 |
| 4 | 樣品稀釋液 | 3ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
| 5 | 顯色劑A液 | 3ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
| 6 | 顯色劑B液 | 3ml×1瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
標(biāo)本要求：
1．標(biāo)本處理：血清,、血漿標(biāo)本可直接檢測
2．標(biāo)本按要求制備后盡早進(jìn)行實驗,。如不能及時檢測，可將標(biāo)本在
3．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
操作步驟：
1. 編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號,，每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔,、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）
2. 加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照50μl,。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,，
3. 溫育：用封板膜封板后置
4. 配液：將20倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl,，再加入顯色劑B 50μl,，輕輕震蕩混勻，
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
結(jié)果判定：
試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為犬細(xì)小病毒（PPV）抗體陰性
陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為犬細(xì)小病毒（PPV）抗體陽性
注意事項
1．操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，本試劑不同批號組分不得混用,。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
3．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果,。
4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
5．底物請避光保存,。
6．試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長檢測時,，參考波長為630nm
7．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為
規(guī)格：
48人份/盒
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2
2．有效期：6個月