QQ交談
您所在位置：請輸入產(chǎn)品關(guān)鍵字：
郵編：200431
聯(lián)系人：王小姐
電話：021-56640936
傳真：021-33250231
手機：13122441390 15900755943
留言：發(fā)送留言
個性化：www.shifengsj.com
網(wǎng)址：www.shfeng-edu.com
商鋪：http://sorrent.com.cn/st236594/
聯(lián)會復(fù)合體的染色與觀察
點擊次數(shù)：2290 發(fā)布時間：2017-5-9
實 驗 目 的
1. 學(xué)習(xí)光學(xué)顯微鏡下顯示聯(lián)會復(fù)合體的實驗技術(shù)
2. 觀察光鏡下聯(lián)會復(fù)合體的形態(tài)結(jié)構(gòu)
實 驗 原 理
聯(lián)會復(fù)合體是減數(shù)分裂前期同源染色體配對形成的非*性核內(nèi)特殊結(jié)構(gòu)，典型的聯(lián)會復(fù)合體由三股平行的線狀結(jié)構(gòu)組成,，即兩條平行側(cè)線和一條纖細的中央軸組成,。一般開始于偶線期，成熟于粗線期,，消失于雙線期,。它與減數(shù)分裂三個重要環(huán)節(jié)同源染色體聯(lián)會、交換以及分離有著密切關(guān)系,。大量工作表明,，聯(lián)會復(fù)合體在真核生物的減數(shù)分裂過程中是普遍存在的。
實 驗 用 品
一,、材料 雄性小白鼠
二,、器材
離心機、顯微鏡,、水浴,、培養(yǎng)皿、鑷子,、剪刀,、吸管、燒杯,、量筒,、離心管(10ml)、酒精燈,。
三,、試劑 (所用試劑均為AR級)
1、0.7%檸檬酸鈉(檸檬酸三鈉)溶液,。
2,、3%中性福爾馬林(甲醛溶液):甲醛8.3ml，醋酸鈉() 1.1g,，加蒸餾水91.7ml,。
3,、50%硝酸銀溶液
4、明膠顯影液: 稱取2g明膠(gelatin)粉末溶解于99ml蒸餾水中,，加1ml甲酸,。
5、甲醇-冰醋酸
實 驗 方 法
脫頸處死動物取睪丸
↓
放2ml 0.7%檸檬酸鈉培養(yǎng)皿中
↓
釋放曲細精管內(nèi)容物(剪開白膜,，用解剖針和小彎鑷挾出曲細精管并剪碎,，用吸管輕輕吹打)
↓移至刻度離心管中
加8ml 0.7%檸檬酸鈉溶液制成細胞懸液
↓
室溫下低滲45~60min
↓
低滲終止*min，加3%中性甲醛溶液0.3ml,，至zui終濃度為0.1%,，混勻
↓
常規(guī)離心(1000r/min)
↓棄上清
甲醇和冰醋酸(3:1)混合液固定
↓
空氣干燥法制片(關(guān)鍵是長時間的低滲液處理和添加福爾馬林溶液)
↓
銀染
[附] 銀染方法
(1)在培養(yǎng)皿底部放一用少量蒸餾水潤濕的濾紙，上放2根小玻棒(或竹桿),，置水浴內(nèi)保溫(80℃),。(2)玻片標本細胞面朝上平放其上，加4滴50%硝酸銀溶液和2滴明膠顯影液,，復(fù)以蓋玻片(或擦鏡紙),，直到玻片標本呈金褐色為止，一般為3-4min,。(3)移除蓋片,，并用蒸餾水快速漂洗，晾干,。(4)觀察或攝影,，分析。
實 驗 結(jié) 果
銀染后的聯(lián)會復(fù)合體呈金黃或黃褐色,，兩條同源染色體聯(lián)會較緊,，但端部仍可見聯(lián)會復(fù)合體結(jié)構(gòu)的雙股性?？梢奩染色體的大部分和X染色體的一部分局部配對,，形成短而清晰的聯(lián)會復(fù)合體。