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細胞和細胞內(nèi)含物的觀察
點擊次數(shù)：1428 發(fā)布時間：2016-11-21
細胞質(zhì)內(nèi)含有多種細胞器。有些細胞器如線粒體,、高爾基體,、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、溶酶體等普遍存在于各種細胞中,，而另有些細胞器如葉綠體,，只存在于植物細胞中。細胞質(zhì)內(nèi)的這些結(jié)構(gòu),，除葉綠體外,，一般在光學顯微鏡下不易看見，必須經(jīng)過一定的固定染色方法處理后,，才能看到大多數(shù)細胞器，或直接用相差顯微鏡觀察,。
線粒體
線粒體是一種動態(tài)的易變結(jié)構(gòu),。經(jīng)過處理在光學顯微鏡下呈現(xiàn)為顆粒狀、棒狀或彎曲細線,。線粒體的形態(tài)和數(shù)量隨不同生物,、不同組織及不同生理狀態(tài)而發(fā)生變化，例如肝細胞、胰細胞的線粒體通常呈線狀,，成熟的卵細胞內(nèi)線粒體呈顆粒狀,，腎細胞內(nèi)的線粒體呈棒狀。顯示線粒體的方法可以概括為以下幾種：
1．生活細胞的觀察,。如將組織培養(yǎng)細胞或其他生活細胞,，放在相差顯微鏡下，就可以看到細胞質(zhì)內(nèi)有線狀小體活動,，這就是線粒體,。
細胞和細胞內(nèi)含物的觀察2．活細胞染色法。就是利用某些無毒或毒性較小的染料,，顯示出細胞內(nèi)某些特殊結(jié)構(gòu)存在的真實性,，而并不對細胞的活動有影響，如Janus green B（詹納斯綠B）,，就是一種毒性較小的堿性染料,。將其配制成一定濃度，對活細胞進行染色,，在細胞質(zhì)內(nèi)可以看到被染成藍綠色的線狀或顆粒小體,，這就是線粒體。還可看到其在細胞質(zhì)內(nèi)的活動狀況,。線粒體所以能顯示出藍綠色,，是由于線粒體中具有細胞色素氧化酶系統(tǒng)，它是染料始終處于氧化狀態(tài)呈藍綠色,，而在周圍的細胞質(zhì)中的染料被還原呈無色,。
3． 固定染色法（即*制片法）。用特殊的固定液染色處理動物的組織或細胞后,，可顯示出線粒體的形態(tài),。但所用材料必須新鮮，否則線粒體常因已經(jīng)破壞而顯示不出,，線粒體的組成成分主要是脂蛋白,，脂類又以磷脂為主，用于線粒體的固定液含有餓酸,，重鉻酸鉀等,。因為兩者均能使脂類物質(zhì)保存下來，故可顯示出線粒體的形態(tài),。用于顯示線粒體形態(tài)的固定,、染色方法較多，常用的有Altmann染色法,、Regand染色法及Chmpy-Kull染色法等,，但欲顯示線粒體的細微結(jié)構(gòu),，則要用電鏡技術(shù)。
4．生化分離提取方法,。在一定的低溫條件下,，將組織細胞破碎制備成勻漿，用于線粒體組分及其在不同生理狀態(tài)的分離分析研究,。
高爾基體
高爾基體顯示的方法,，目前使用較多的是：
1．固定染色法。1889年Golgi用鍍銀的方法顯示出這種細胞器,，目前仍應用AgNO3或餓酸處理材料,，將高爾基體顯示為棕黑色。這是由于AgNO3,、餓酸在高爾基體的部位被還原之故,，所以顯出高爾基體的形態(tài)及其在細胞內(nèi)的分布。常用的方法有DaFano硝酸鈷-硝酸銀鍍銀法,，Aoyama鍍銀法及Romony Cajal鍍銀法等,，而欲顯示其細胞結(jié)構(gòu)，就得使用電鏡技術(shù),。
2．活體染色法,。將中性紅配制成一定的濃度，對細胞進行活體染色,，以顯示高爾基體,。但此種顯示高爾基體的方法，仍不如詹納斯綠顯示線粒體的方法更為廣泛,。因為中性紅只能染高爾基體的液泡部分,，因此有一定的局限性。